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J-GLOBAL ID：201702218548996246   整理番号：17A0309741

Bombyx moriにおけるCRISPR標的部位の拡大【Powered by NICT】

Expansion of CRISPR targeting sites in Bombyx mori

著者 (11件)： Zeng Baosheng (Key Laboratory of Insect Developmental and Evolutionary Biology, Institute of Plant Physiology and Ecology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200032, China) ,  Zeng Baosheng (University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China) ,  Zhan Shuai (Key Laboratory of Insect Developmental and Evolutionary Biology, Institute of Plant Physiology and Ecology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200032, China) ,  Wang Yueqiang (Key Laboratory of Insect Developmental and Evolutionary Biology, Institute of Plant Physiology and Ecology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200032, China) ,  Huang Yuping (Key Laboratory of Insect Developmental and Evolutionary Biology, Institute of Plant Physiology and Ecology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200032, China) ,  Xu Jun (Key Laboratory of Insect Developmental and Evolutionary Biology, Institute of Plant Physiology and Ecology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200032, China) ,  Xu Jun (University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China) ,  Liu Qun (Key Laboratory of Insect Developmental and Evolutionary Biology, Institute of Plant Physiology and Ecology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200032, China) ,  Li Zhiqian (Key Laboratory of Insect Developmental and Evolutionary Biology, Institute of Plant Physiology and Ecology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200032, China) ,  Huang Yongping (Key Laboratory of Insect Developmental and Evolutionary Biology, Institute of Plant Physiology and Ecology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200032, China) ,  Tan Anjiang (Key Laboratory of Insect Developmental and Evolutionary Biology, Institute of Plant Physiology and Ecology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200032, China)
資料名： Insect Biochemistry and Molecular Biology  (Insect Biochemistry and Molecular Biology)
巻： 72  ページ： 31-40  発行年： 2016年05月 
JST資料番号： D0873A  ISSN： 0965-1748  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： イギリス (GBR)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： CRISPR/Cas9システムは革命的なゲノム工学ツールとして証明されている。多くの場合,単一ガイドRNA(sgRNA)標的部位はGN19NGGまたはGGN18NGGとして設計され,RNA Pol IIIプロモーターの開始ヌクレオチドの制限のためにした。ここでは,Bombyx mori,鱗翅目のモデル昆虫からU6プロモーターはヌクレオチド塩基(アデニン,チミン,グアニンあるいはシトシン)を開始剤とするsgRNA,CRISPR標的空間を拡大する,を発現することを示した。N20NGGはGN19NGGの代わりにCRISPR標的部位として設定し,適切なターゲットの有意な増加を明らかにし,Z性染色体上で起こる最高の増加がゲノムの詳細な膨張指数を解析した。Cas9,BmN細胞で有意に減少したEGFP発現と組み合わせた増強緑色蛍光蛋白質(EGFP)を標的とする異なるタイプN20NGG sgRNAのトランスフェクション。内因性遺伝子BmBLOS2も各種N20NGG sgRNAを用いて破壊された,異なる初期ヌクレオチドとGC含量とN20NGG sgRNAの切断効率をin vitroで評価した。BmBLOS2遺伝子を標的としたCas9とsgRNAを発現するトランスジェニックカイコは多くのタイプの変異誘発で発生させた。ノックアウト蚕における典型的な透明皮膚表現型は安定であり,遺伝性であり,N20NGG sgRNAはin vivoで十分に機能することを示唆した。著者らの知見は,CRISPR/Cas9ターゲット設計の更新を表し,昆虫機能性遺伝学研究を大いに促進するだろう。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： RNA【核酸】 ,  変異誘発 ,  性染色体 ,  プロモーター領域 ,  トランスフェクション ,  in vitro実験 ,  ゲノム ,  ヌクレオチド ,  表現型 ,  *カイコガ ,  窒素複素環化合物 ,  ヒドロキシ化合物 ,  ウレア化合物
準シソーラス用語： GC含量 ,  EGFP ,  *CRISPR配列 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： CRISPR/Cas9 ,  U6プロモータ ,  sgRNA ,  導入遺伝子 ,  Bombyx mori

分類 (2件)： 遺伝子の構造と化学  (EC02020U) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J)

物質索引 (2件)： グアニン ,  チミン

タイトルに関連する用語 (3件)： CRISPR ,  標的 ,  拡大