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J-GLOBAL ID：201702223120833358   整理番号：17A0059501

大腸菌CFTCFTにおけるCURLI遺伝子のクローニング,発現,精製および構造解析を行った。【JST・京大機械翻訳】

Expression, purification and structural analysis of csgF gene of curli systems from Escherichia coli CFT073

著者 (3件)： Lu Li (Key Laboratory of Non-Wood Forest Nurturing and Protection of National Ministry of Education, Central South University of Forestry and Technology, Hunan Provincial Cooperative Innovation Center of Non-Wood Forest Cultivation and Utilization) ,  Cao Baohua (Institute of Biophysics, Chinese Academy of Sciences) ,  Wang Yiqiang (Key Laboratory of Non-Wood Forest Nurturing and Protection of National Ministry of Education, Central South University of Forestry and Technology, Hunan Provincial Cooperative Innovation Center of Non-Wood Forest Cultivation and Utilization)
資料名： Weishengwuxue Tongbao  (Weishengwuxue Tongbao)
巻： 43  号： 9  ページ： 2063-2071  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2731A  ISSN： 0253-2654  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】本研究は,大腸菌CFT 073におけるCULRI蛋白質の効率的発現を研究し,精製条件と三次元構造を探索し,CURLIの生合成機構を研究するための理論的基礎を提供することを目的とした。【方法】CSGF遺伝子を大腸菌のCFT遺伝子によって増幅した。組換えプラスミドPET28A-CSGF(NSP)-N-6HIS,PET28A-CSGF(20-129)-N-6HIS,PET28A-CSGF-6HISおよびPET28A-CSGF(NSP)-C6HISを構築した。大腸菌DH5Αに形質転換し,BL21(DE3)に発現させた。SDS-PAGEにより,大腸菌におけるCSGF蛋白質の発現を同定し,NI-NTA HIS BIND RESINとゲル 析色により精製した。SDS-PAGEとWESTERN BLOTTING法により、分析を行った。CSGF DOWN実験を用いて、CSGFととの相互作用を研究し、ホモロジーモデリング法により組換えタンパク質CSGFの三次構造を分析した。【結果】目的遺伝子遺伝子をクローン化し,安定蛋白質を安定化するための条件を選択した。50MMOL/L SODIUM ACETATE(PH 5.0),150MMOL/L NACL,5% GLYERCOL;CSGFはCSGGと相互作用し,CSGF三次元構造モデルは(Β/Α)を示した。[結論]高純度の安定したCSGF組換えタンパク質とその三次元構造を獲得し、CSGFの構造と機能を更に研究するために基礎を築いた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： タンパク質 ,  三次元 ,  SDS-PAGE ,  *遺伝子 ,  三次構造 ,  ゲル ,  *構造解析 ,  クローン ,  形質転換 ,  *大腸菌
準シソーラス用語： 高純度 ,  構造モデル ,  ホモロジーモデリング ,  三次元構造 ,  *クローニング , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： Escherichia coli CFT073 ,  CsgF ,  Gene cloning ,  Protein expression and purification ,  Gel exclusion chromatography

分類 (4件)： 遺伝子発現  (EC02040Q) ,  酵素一般  (EB09010D) ,  酵素生理  (EG03052C) ,  微生物の生化学  (EG03020N)

タイトルに関連する用語 (6件)： 大腸菌 ,  遺伝子 ,  クローニング ,  発現 ,  精製 ,  構造解析