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J-GLOBAL ID：201702227774959796   整理番号：17A0108751

ヒトIGE-FCドメインの遺伝子クローニング,原核発現およびモノクローナル抗体の調製【JST・京大機械翻訳】

Cloning, expression of human IgE-Fc and generation of mouse anti-human IgE monoclonal antibody

著者 (8件)： Cui Lulu (Jinzhou Medical University) ,  Bi Jiacheng (Shenzhen Institutes of Advanced Technology, Chinses Academy of Sciences) ,  Li Junxin (Shenzhen Institutes of Advanced Technology, Chinses Academy of Sciences) ,  Liu Luyan (Shenzhen Institutes of Advanced Technology, Chinses Academy of Sciences) ,  Ye Xiufeng (Shenzhen Second People’s Hospital) ,  Zheng Mingxing (Shenzhen Second People’s Hospital) ,  Wan Xiaochun (Shenzhen Institutes of Advanced Technology, Chinses Academy of Sciences) ,  Yu Guang (Jinzhou Medical University)
資料名： Zhongguo Yiyao Shengwu Jishu  (Zhongguo Yiyao Shengwu Jishu)
巻： 11  号： 3  ページ： 242-246  発行年： 2016年 
JST資料番号： C3160A  ISSN： 1673-713X  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】アレルギー性疾患の研究と診断のための基礎を提供するために,/ IGEモノクローナル抗体を調製する。【方法】CRL 細胞のCDNAをテンプレートとして用いて,IGE FCΕ3-4遺伝子配列を増幅し,PET-32A(+)ベクターに連結し,大腸菌BL21(DE3)に形質転換した。次に,発現した封入体を変復性により精製し,精製した蛋白質をアフィニティークロマトグラフィーにより精製し,SDS-PAGEにより精製効果を検証した。最後に,精製蛋白質を抗原としてBALB/Cマウスを免疫化し,3回免疫後にマウス脾臓細胞とSP2/0細胞を融合させた。ELISA法によりヒトIGE蛋白質を結合できる陽性クローンをスクリーニングし、ELISA、WESTERN BLOTなどの手段を用いてハイブリドーマの分泌されたモノクローナル抗体の特異性を同定した。【結果】PET-32A(+)-IGE FCΕ3-4ベクターを首尾よく構築し,IGE FCΕ3-4蛋白質を精製した。この蛋白を免疫原性マウスとし、ハイブリドーマ細胞株を作製し、その分泌されたモノクローナル抗体はヒトIGEタンパク質に特異的に結合でき、ELISA、WESTERN BLOTなどの手段によるヒトIGEの検出に用いることができる。結論:ヒトIGEの特異的検出のためのモノクローナル抗体を得ることができ,ヒトIGEの検出及び喘息などのアレルギー性疾患の研究,診断及び治療に基礎を築いた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 封入体 ,  *遺伝子クローニング ,  ハイブリドーマ ,  ベクター ,  *モノクローナル抗体 ,  ELISA ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  アレルギー疾患 ,  免疫原性 ,  形質転換 ,  *ヒト ,  クローン ,  SDS-PAGE
準シソーラス用語： 脾細胞 ,  遺伝子配列 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： Immunoglobulin E ,  Antibodies ,  monoclonal ,  Allergy disease

分類 (2件)： 抗原・抗体・補体の生産と応用  (ED04030W) ,  遺伝子発現  (EC02040Q)

タイトルに関連する用語 (6件)： ヒト ,  ドメイン ,  遺伝子クローニング ,  発現 ,  モノクローナル抗体 ,  調製