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J-GLOBAL ID：201702232607977692   整理番号：17A0658897

CRISPR/Cas9と蛍光濃縮によるチャイニーズハムスター卵巣細胞における導入遺伝子の加速された相同性指向標的組込み【Powered by NICT】

Accelerated homology-directed targeted integration of transgenes in Chinese hamster ovary cells via CRISPR/Cas9 and fluorescent enrichment

著者 (6件)： Lee Jae Seong (The Novo Nordisk Foundation Center for Biosustainability, Technical University of Denmark, Horsholm, 2970, Denmark) ,  Grav Lise Marie (The Novo Nordisk Foundation Center for Biosustainability, Technical University of Denmark, Horsholm, 2970, Denmark) ,  Pedersen Lasse Ebdrup (The Novo Nordisk Foundation Center for Biosustainability, Technical University of Denmark, Horsholm, 2970, Denmark) ,  Lee Gyun Min (The Novo Nordisk Foundation Center for Biosustainability, Technical University of Denmark, Horsholm, 2970, Denmark) ,  Lee Gyun Min (Department of Biological Sciences, KAIST, Yuseong-gu, Daejeon, Republic of Korea) ,  Kildegaard Helene Faustrup (The Novo Nordisk Foundation Center for Biosustainability, Technical University of Denmark, Horsholm, 2970, Denmark. [e-mail])
資料名： Biotechnology and Bioengineering  (Biotechnology and Bioengineering)
巻： 113  号： 11  ページ： 2518-2523  発行年： 2016年 
JST資料番号： D0019A  ISSN： 0006-3592  CODEN： BIBIAU  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 部位特異的遺伝子座への標的遺伝子組込はCRISPR/Cas9ゲノム編集技術と相同性指向性修復(HDR)経路を介してチャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞で達成できた。HDRの低い効率は,しばしば抗生物質選択,複数の部位で同義遺伝子の標的組込みを制限するが必要である。HDR仲介標的統合を改善するために,選択マーカーの使用を避けながら,HDR向上のための化学処理,およびゲノム編集細胞の蛍光富化はCHO細胞で評価した。化学処理はH DRを介した標的統合を改善しなかった。とは対照的に,Cas9とドナー構築物における蛍光マーカーはFACS濃縮を可能にし,HDR媒介ゲノム編集による細胞の数の3倍の増加をもたらした。本濃縮法と組み合わせて,モデル蛋白質(抗体を含む)をコードする大きな導入遺伝子を成功裏に標的とした総合的した。この方法は,合理的な方法で安定なCHO生産細胞株の標的生成のための簡単で迅速な戦略を提供した。Copyright 2017 Wiley Publishing Japan K.K. All Rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： *CHO細胞 ,  タンパク質 ,  抗生物質 ,  抗体 ,  *遺伝子 ,  *相同性 ,  *卵巣 ,  *蛍光
準シソーラス用語： FACS ,  *Cricetulus griseus ,  ゲノムエディティング ,  *導入遺伝子 ,  *Cas9 ,  *CRISPR配列 ,  化学処理 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： 中国ハムスター卵巣細胞 ,  CRISPR/Cas9 ,  蛍光濃縮 ,  相同性指向性修復 ,  を標的とした統合

分類 (3件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  遺伝子発現  (EC02040Q) ,  動物の生化学  (EJ01050P)

タイトルに関連する用語 (10件)： CRISPR ,  Cas9 ,  蛍光 ,  濃縮 ,  チャイニーズハムスター卵巣細胞 ,  導入遺伝子 ,  加速 ,  相同性 ,  標的 ,  組込み