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J-GLOBAL ID:201702233110110913   整理番号:17A0351585

リステリア菌ベクターワクチンのワクチン遺伝子組換えの構築とタンパク発現の検証【JST・京大機械翻訳】

Genetic Recombiniation and Protein Expression Detection of Listeria-based Tuberculosis Vaccine Candidates
著者 (6件):
資料名:
巻: 47  号:ページ: 819-824  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2598A  ISSN: 1672-173X  CODEN: SDXYAY  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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目的:遺伝子組換えにより、リステリア菌、ヒツジリステリア菌をベクターとする新型結核ワクチンワクチンを構築し、そしてタンパク発現の検証を行い、結核ワクチン研究と結核予防に新しい構想と新しい方法を提供する。方法:体外遺伝子結合、プラスミド転化などの技術を用いて、本実験室はすでに結核抗原AG85C、ESAT-6タンパクの2種類の遺伝子カセットをコードし、リステリア、,の相同配列を持つ標的プラスミドに挿入した。標的プラスミドをに ,と, ,に変換し,42°Cと30°Cで連続的に継代し,相同組換ハイブリダイゼーション原理と遺伝子ターゲティング技術を用いて,2つのコード化結核抗原の抗原遺伝子カセットをコード化した。病原性遺伝子(ACTAとPLCB)がノックアウトされたリステリア菌,ヒツジリステリア菌群,および弱毒化されたヒツジ李斯特菌基群にそれぞれ統合した。組換え型の白斑病、抗生物質の耐性及びPCRのスクリーニングを行い、そしてWESTERN BLOTにより、その菌体のタンパク質及び分泌タンパクの発現状況を測定した。【結果】5つの組換え型の組換え株を構築し,それらの配列はPCRによって確認され,配列決定に成功した。組換え菌はエリスロマイシン耐性遺伝子を持たず、表現型の特徴は予想される。そのうち、組換え菌LI-RV0129C、LI-ΔACTAPLCB-RV0129Cは、結核菌AG85C抗原タンパク質を発現し、LI-ΔACTAPLCB-RVチップは予想された結核菌ESAT-6抗原タンパク質を発現した。組換え型結核菌は,対応する結核抗原蛋白質を発現しなかった。結論:3つの菌株を構築し,ヒツジ RV C(コード化AG85C)抗原遺伝子カセットまたはRVチップ(コード化ESAT-6)抗原遺伝子カセットを持ち,対応する抗原蛋白質を発現する新型結核ワクチンワクチンを構築した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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微生物検査法  ,  食品の汚染 

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