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J-GLOBAL ID:201702234776577802   整理番号:17A0528929

蛋白質代謝経路は,鶏雄性の生殖細胞分化の調節に関与している。【JST・京大機械翻訳】

Regulatory Study of Protein Metabolism During the Differentiation Process of Chicken Male Germ Cells
著者 (9件):
資料名:
巻: 49  号: 24  ページ: 4814-4823  発行年: 2016年 
JST資料番号: W1459A  ISSN: 0578-1752  CODEN: CKNYAR  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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【目的】本研究の目的は,雄性生殖細胞の分化における蛋白質代謝の役割を調査し,IN VITROでの雄性生殖細胞の分化誘導に関する研究の基礎を提供することである。[方法]高純度のESC、原始生殖細胞(PRIMORDIAL GERM CELLS,PGCS)と精原幹細胞(SPERMATOGONIA STEM CELL,SSCS)をフローサイトメトリーにより獲得した。全RNAを抽出し,RNA-SEQ法を用いて3つの細胞の転写を検出した。次に,WEGO(WEB と OF GENES)とKEGG(経路 ENCYCLOPEDIA OF GENES AND GENOMES)経路の濃縮分析を行った。鶏雄性の生殖細胞分化過程におけるタンパク質代謝に関与する重要な経路及びその主要遺伝子を選別し、RT-QPCR(REAL TIME 定量 PCR)により、一部の重要な差異遺伝子の発現変化を測定したRNA-SEQ(RNA SEQUENCING)の結果と比較し、同時に体内と体外のレベルで重要な遺伝子のNOS2に対して抑制を行った。各群の異なる日数の細胞形態変化を観察し、NOS2とC-KIT、,、,8、DAZL、,Α6とINTEGRINΒ1などの生殖マーカー遺伝子発現の変化状況を測定した。[結果]雄性生殖細胞分化の全段階において、697個の差異遺伝子が生物代謝に参与し、アルギニン-プロリン代謝経路、チロシン代謝経路及びトリプトファン代謝経路を明らかにし、この3つの経路にこれらの遺伝子のESCSへの分化過程における発現変化の傾向は,RNA-SEQにおけるそれらの結果と一致した。NOS2遺伝子の阻害後,NOS2,C-KIT,,,,8,DAZL,,Α6およびINTEGRINΒ1のような生殖マーカー遺伝子は,ブランク群と対照群の間に有意差がなかったが,阻害剤群NOS2とC-KIT,,,STRA8,,,,Α6とINTEGRINΒ1などの生殖マーカー遺伝子のMRNA発現量は低下した。しかし、NOS2遺伝子を体外で抑制した後、対照群のESCSは2、4、6、8と10日内に細胞が増殖したが、体は出現しなかった。RA誘導群では、2日目に小さい胚様体が出現し、4日目に胚体が増大し、しかも数が増加し、6日目の胚胎端が破裂し始め、8日目に抑制剤群の中で、ESCSは2、4、6、8と10D内に无類胚体が出現し、しかも対照群の細胞の増殖より遅かった。RA+抑制剤群の中で、2と4D内に无類胚体が出現し、細胞の増殖が遅く、6Dに小さい胚様体が出現し、8D類の胚胎の数量は少し増加し、阻害剤の阻害により,それらは阻害された。NOS2とC-KIT,,,STRA8,,,,Α6とINTEGRINΒ1などの生殖マーカー遺伝子の発現量はRA誘導群,抑制剤群とRA+抑制剤群において対照群に比べ,いずれも[結論]RNA-SEQ技術とバイオインフォマティクス法に基づき、ESCSの雄性生殖細胞分化過程におけるアルギニン-プロリン代謝経路及び鍵遺伝子NOS2を選別した上で、NOS2遺伝子の鶏体内及び体ESCSは雄性生殖細胞への分化過程を阻害した。これらの結果は,アルギニン-プロリン代謝経路と鍵遺伝子NOS2が,雄性生殖細胞の分化において重要な役割を果たすことを示した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (3件):
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生化学的分析法  ,  細胞生理一般  ,  バイオアッセイ 
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