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J-GLOBAL ID:201702236282438930   整理番号:17A0095991

クリミア-コンゴ出血熱ウイルス可視化逆転写ループ法等の迅速検出法の確立【JST・京大機械翻訳】

A reverse transcription loop-mediated isothermal amplification for rapid visual detection of Crimean-Congo hemorrhagic fever virus
著者 (8件):
資料名:
巻: 30  号:ページ: 355-360  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2338A  ISSN: 1003-9279  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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【目的】クリミア コンゴ(HEMORRHAGIC)の出血熱ウイルス(CRIMEAN-CONGO HEMORRHAGIC FEVER VIRUS)を確立する。方法: のS遺伝子を合成し、組換えプラスミドを構築し、体外転写を鋳型RNAとし、オンラインで3組のLAMPプライマーを設計し、リアルタイムPCR法を用いて最適なプライマーを選び、ヒドロキシ(HYDROXYNAPHTHOL BLUE,HNB)を指示薬とした。可視化RT-LAMP反応系を確立した。結果:リアルタイムの濁度測定結果により、合成した3組のLAMPプライマーのうち第1組のプライマーの増幅効率が最も高く、ピーク値が20MINに現れた。ループを添加した後、増幅効率は更に向上し、13MINでピーク値に達した。最適プライマーを用いて確立したCCHFV可視化RT-LAMP検出限界は10コピー/ΜLであり,検出時間は30分であり,入れ子RT-PCR法とリアルタイムRT-PCR法よりそれぞれ1-3桁高かった。この方法は安定性が良く、症状に近い病原体例えば腎臓症候群の熱漢坦ウイルス(ハンタンとソウル)、マールブルグウイルス、新型ブニヤウイルスウイルス、エボラウイルス(GPタンパクとVPタンパク)と交差反応が生じる。結論:確立したCCHFV可視化RT-LAMP検査法は、感度が良く、特異性が高く、迅速、操作が簡単で、開口を必要とせず、直接観察結果が得られ、条件の限られた基礎単位と遠隔地域に適用できる。しかし、臨床サンプルをさらに検証する必要がある。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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微生物検査法  ,  微生物検査 

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