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J-GLOBAL ID：201702236466266349   整理番号：17A0297748

ヒト前立腺特異抗原の単鎖抗体の発現と活性を同定する。【JST・京大機械翻訳】

著者 (8件)： Han Donghui (第四軍医大学西京医院泌尿外科) ,  Wu Jieheng (第四軍医大学基礎部免疫学教研室) ,  Ouyang Qing (第四軍医大学基礎部免疫学教研室) ,  Wei Ming (第四軍医大学西京医院泌尿外科) ,  Xi Wenjin (第四軍医大学基礎部免疫学教研室) ,  Yang Angang (第四軍医大学基礎部免疫学教研室) ,  Wen Weihong (第四軍医大学基礎部免疫学教研室) ,  Qin Weijun (第四軍医大学西京医院泌尿外科)
資料名： Xibao yu Fenzi Mianyixue Zazhi  (Xibao yu Fenzi Mianyixue Zazhi)
巻： 32  号： 8  ページ： 1120-1123  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2523A  ISSN： 1007-8738  CODEN： XFMZFM  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:ヒト前立腺特異抗原(PSMA)単鎖抗体(SCFV)の原核生物発現ベクターを構築し、大腸菌において発現を誘導し、精製した後、その生物学的活性を同定する。【方法】ヒト PSMAのSCFV遺伝子を原核生物発現ベクターPET302にクローン化し,大腸菌BL21に形質転換し,イソプロピル-Β-D-チオ(IPTG)により誘導し,可溶性発現を誘導した。SDS-PAGEとWESTERN BLOT法により発現を確認した後、NI(2+)-NTAアフィニティークロマトグラフィーによりタンパク質を精製した。フローサイトメトリーを用いて,SCFVとPSMAの陽性および陰性細胞との結合を検出した。【結果】ヒト抗 SCFVの原核生物発現ベクターを首尾よく構築した。30°C,IPTG濃度が0.05MMOL/Lのとき,可溶性蛋白質の可溶性発現が達成された。NI(2+)-NTAアフィニティークロマトグラフィーによって精製した後に,高純度の抗 SCFV蛋白質が得られた。フローサイトメトリーの結果,このSCFVはPSMA陽性前立腺癌細胞と特異的に結合するが,PSMA陰性PC-3細胞とは結合しないことが示された。結論:大腸菌は可溶性ヒトヒト SCFVを発現することができ、得られた抗PSMA SCFVは特異的にPSMA陽性前立腺癌細胞と結合することができる。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 原核生物 ,  クローン ,  *前立腺特異抗原 ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  形質転換 ,  可溶性 ,  フローサイトメトリー ,  生物活性 ,  *ヒト ,  SDS-PAGE ,  溶解性
準シソーラス用語： PC-3細胞 ,  可溶性蛋白質 ,  発現ベクター ,  前立腺特異的膜抗原 ,  *一本鎖抗体 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (2件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  抗原・抗体・補体の生産と応用  (ED04030W)

タイトルに関連する用語 (6件)： ヒト ,  前立腺特異抗原 ,  単鎖抗体 ,  発現 ,  活性 ,  同定