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J-GLOBAL ID:201702238857899389   整理番号:17A0409038

磁気ビーズリポソームハイブリッドは個人用グルコース計を用いたDNAメチルトランスフェラーゼ活性の高感度可搬型検出を可能にする【Powered by NICT】

Magnetic bead-liposome hybrids enable sensitive and portable detection of DNA methyltransferase activity using personal glucose meter
著者 (4件):
資料名:
巻: 87  ページ: 537-544  発行年: 2017年 
JST資料番号: D0173C  ISSN: 0956-5663  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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DNAメチルトランスフェラーゼ(MTase)はゲノムメチル化パターン,癌と細菌性疾患との密接な関係を持つの維持に重要な役割を果たしている。これはDNA MTase検出と阻害剤スクリーニングのための高感度,簡単,かつロバストなアッセイを開発する必要性を促進した。ここで,簡単,高感度,特異的DNA MTase活性アッセイはDNA MTase及び阻害剤スクリーニングの定量的検出のための個人用グルコースメーター(PGM)と組み合わせた磁性ビーズリポソームハイブリッドに基づいて開発した。最初に,磁性ビーズリポソームハイブリッドプローブはp_2DNA官能化グルコアミラーゼカプセル化リポソーム(GEL)を伴うp_1DNA官能化磁性ビーズのハイブリダイゼーションにより設計した。多機能の設計による標的認識,磁気分離と信号増幅を統合している。,Dam MTaseの存在下で,ハイブリッドプローブがメチル化され,メチル化感受性制限エンドヌクレアーゼDpnIにより開裂され,磁気分離による磁気ビーズから分離したリポソームを作成した。最後に,分離されたリポソームは分解され,多重ターンオーバを持つ信号基板アミロースの加水分解を触媒するためにカプセル化されたグルコアミラーゼを遊離し,PGMによる定量的読出しのための大量のグルコースを生成した。提案したアッセイでは,磁気ビーズリポソームハイブリッドはリポソームとそれに続く二次酵素的増幅によるからの多数のグルコアミラーゼを放出を介して初代増幅に起因して優れた感度を提供した。携帯型定量装置PGMの使用は複雑な装置および精巧な操作の必要性を回避する,オンサイト検出のための方法は簡単で実行可能である。さらに,提案した分析は,疾患(s)処理のためのダムのための複雑な生物学的マトリックスと適切なスクリーン阻害剤に成功裏に適用された。結果は,このアプローチが医学研究および早期臨床診断におけるDNA MTase検出と遮蔽ポテンシャル薬物のための単純で高感度でロバストなプラットフォームを提供することを明らかにした。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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分類 (3件):
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生化学的分析法  ,  核酸一般  ,  バイオアッセイ 
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