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J-GLOBAL ID：201702239519513521   整理番号：17A0161260

レンチウイルス媒介テロメラーゼ逆転写酵素の過剰発現によるヒト上皮性上皮安定細胞系の構築【JST・京大機械翻訳】

Construction of human mucosa oral epithelial cell lines overexpressing telomerase reverse transcriptase gene mediated by lentivirus

著者 (8件)： Zeng Sa (School of Stomatology, Lanzhou University) ,  Qin Xiaodong (Lanzhou Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences) ,  He Xiangyi (School of Stomatology, Lanzhou University) ,  Che Chunxiao (School of Stomatology, Lanzhou University) ,  Zhang Xiao (School of Stomatology, Lanzhou University) ,  Xie Siyu (School of Stomatology, Lanzhou University) ,  Sun Guijun (School of Stomatology, Lanzhou University) ,  Wang Lihe (School of Stomatology, Lanzhou University)
資料名： Huaxi Kouqiang Yixue Zazhi  (Huaxi Kouqiang Yixue Zazhi)
巻： 34  号： 5  ページ： 443-447  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2460A  ISSN： 1000-1182  CODEN： HKYZA4  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:レンチウイルス法により,ヒトテロメラーゼ逆転写酵素(HTERT)遺伝子を安定的に発現する口腔粘膜上皮細胞(OMEC)を樹立し,高効率で安定した永久生化学細胞系を構築する方法を探索する。方法:293T細胞の全RNAを抽出し、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)法によりHTERT遺伝子の全長を増幅し、組み換えレンチウイルスベクターベクター-PURO-HTERTを構築した。レンチウイルス粒子を包装した後、ヒトの正常なOMECを感染させ、プリン抵抗性スクリーニングにより陽性クローンを獲得し、リアルタイム蛍光定量PCR法とWESTERN BLOT法によりHTERT遺伝子MRNAとタンパクの発現レベルを測定した。【結果】PLVX-PURO-HTERT過剰発現レンチウイルスベクターを首尾よく構築し,OMECに感染させた。感染細胞は正常な形態と類似しており,舗装の成長を示した。リアルタイム蛍光定量PCRとWESTERN BLOTの結果により、HTERTは感染細胞中で高発現し、正常細胞と比べ、統計学的有意差が認められた(P<0.05)。結論:レンチウイルス法により、HTERTを過剰発現するOMEC安定細胞系の樹立に成功し、高効率、安定な増殖を実現するために、ヒトの永久生化学細胞系を構築するための実験的基礎を築いた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 感染 ,  スクリーニング ,  クローン ,  *ヒト ,  PCR法 ,  *レンチウイルス ,  蛍光 ,  *上皮 ,  *テロメラーゼ ,  定量的PCR法
準シソーラス用語： レンチウイルスベクター ,  293T細胞 ,  hTERT ,  *細胞株 ,  *過剰発現 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： oral mucosa epithelial cells ,  human telomerase reverse transcriptase ,  lentivirus ,  stable expression ,  immortalization

分類 (3件)： 細胞生理一般  (EF02010S) ,  酵素一般  (EB09010D) ,  遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (7件)： レンチウイルス ,  テロメラーゼ逆転写酵素 ,  過剰発現 ,  ヒト ,  上皮 ,  細胞系 ,  構築