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J-GLOBAL ID:201702246705443755   整理番号:17A0674482

サイクリンD1アンチセンス発現プラスミドの構築と同定は,喘息ラットの気道平滑筋の増殖に及ぼすそれらの影響を評価した。【JST・京大機械翻訳】

Recombination and identification of sense and antisence CyclinD1 eukaryotic expression vectors and the effects of the vectors on the proliferation of airway smooth muscle cell in asthmatic rats
著者 (8件):
資料名:
巻: 43  号:ページ: 247-252  発行年: 2008年 
JST資料番号: C2527A  ISSN: 0513-4870  CODEN: YHHPAL  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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喘息ラットの気道平滑筋細胞におけるサイクリンD1の発現を観察し,サイクリンD1(サイクリンD1)のアンチセンス発現プラスミドを構築し,気管支平滑筋細胞(ASMC)に形質移入した。【目的】喘息ラットのASMC増殖に及ぼすCYCLIND1の影響を研究する。喘息ラットモデルを確立し,免疫蛍光法によりサイクリンD1の発現を検出した。RT-PCRにより,気道1の完全長CDNAを得て,真核生物発現ベクターPCDNA3.1(+)に挿入した。サイクリン1発現プラスミド(PCDNA3.1-CYCLIND1)とアンチセンス発現プラスミド(PCDNA3.1-ASCYCLIND1)を構築した。リポソーム媒介の遺伝子トランスフェクション法を用いて、正逆転写法と空プラスミド(VECTOR)をそれぞれ喘息ラットと正常ラットのASMCにトランスフェクションし、法法を用いてCYCLIND1遺伝子の発現を同定した。喘息ラットのASMC増殖に対するプラスミドの影響を,フローサイトメトリー,メチルチアゾリルテトラゾリウム(MTT),増殖細胞核抗原(PCNA)染色により観察した。結果は以下を示す。(1)対照群と比較して,喘息群におけるサイクリンD1の発現は有意に増加した。(2)制限酵素消化と配列解析により,サイクリンD1のアンチセンス発現プラスミドが首尾よく構築されたことを確認した。PCDNA3.1-サイクリン1群とVECTOR群と比較して,PCDNA3.1-ASCYCLIND1群におけるサイクリンD1の発現は有意に減少した(P<0.01)。(3)対照群と比較して,PCDNA3.1-CYCLIND1群の増殖指数は有意に増加した(P<0.01)。PCDNA3.1-ASCYCLIND1群の増殖指数は有意に減少した(P<0.01)。正常群において,鼠転染群の変化傾向は喘息群と一致した。PCDNA3.1-CYCLIND1は喘息ラットのASMC増殖を促進し、PCDNA3.1-ASCYCLIND1は喘息ラットのASMC増殖を抑制し、CYCLIND1は喘息ASMC増殖のシグナル伝達に重要な役割を果たすことを示唆した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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呼吸器の基礎医学  ,  吸収系一般 

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