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J-GLOBAL ID:201702252034404953   整理番号:17A0355197

DELFTIA SP. T3-6アミド加水分解酵素DAMH結晶の調製およびX線回折分析【JST・京大機械翻訳】

Crystallization and X-ray Diffraction of an Amide Hydrolase DamH from Delftia sp. T3-6
著者 (6件):
資料名:
巻: 38  号:ページ: 1154-1160  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2944A  ISSN: 1000-2286  CODEN: JNXUEV  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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DAMH SP.は株 SP.であった。T3-6が産生するエステル結合加水分解活性を有するアミド酵素は,その原核発現,精製,結晶化条件および蛋白質結晶X線回折条件について検討した。原核生物発現を経て、NI-NTAアフィニティークロマトグラフィーと透析法を用いてタンパク質を精製し、結晶成長に適したタンパク質DAMHを獲得した。289Kで液を用いた気相拡散法による結晶のスクリーニングと調製を行い,蛋白質濃度15MG/ML及び0.2MOL/Lの酢酸アンモニウムを含むPH7.1,21%(W/V)ポリエチレングリコールの緩衝液中で理想的な蛋白質結晶を得た。結晶の回折データを,低温100KでX線回折計(RIGAKU MICROMAX-007 HF)により収集した。結晶回折分解能は3.4A,空間群はP1,格子パラメータはA=14.1A,B=23.9A,C=85.7A,Α=112.6°,Β=77.2°,Γ=89.1°であった。結晶化条件の最適化と結晶化はDELFTIA SP.であった。T3-6 は高分解能結晶調製に参考を提供し,結晶回折データの収集はDAMH三次元構造の解析のための基礎を提供し,DAMHの触媒機構解明に役立つ。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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酵素一般  ,  遺伝子発現 
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