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J-GLOBAL ID:201702255171519621   整理番号:17A0534094

PHIC31インテグラーゼを用いて乳牛乳牛1遺伝子の乳腺恒常発現細胞系を構築した。【JST・京大機械翻訳】

Establishment of mammary cell line stably expressing bovine INSIG1using phiC31 integrase
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巻: 36  号: 12  ページ: 2135-2139  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2276A  ISSN: 1005-4545  CODEN: ZSXUF5  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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PHIC31インテグラーゼを用いて乳牛のインシュリン誘導遺伝子1(INSIG1)の安定発現乳腺細胞系を樹立するため、まず乳牛乳腺組織からINSIG1遺伝子のコード領域をクローニングした。次に,クローン1-C31真核生物発現プラスミドを構築するために,クローン1とC1を,クローン31ベクターにクローン化した。その31インテグラーゼプラスミドをマウスの乳腺細胞に同時形質移入し、プリンを用いて細胞を選別し、蛍光顕微鏡により細胞の緑色蛍光タンパク質の発現を観察し、PCRにより細胞ゲノムにおけるINSIG1蛍光1遺伝子の発現は,蛍光定量的PCRによって検出した。結果は,試験1-C31真核生物ベクターの構築に成功し,PHIC31インテグラーゼと共培養したマウス乳腺細胞を,8MG/Lのプリンでスクリーニングした後,緑色蛍光蛋白質を完全に発現する乳腺細胞系同定により、INSIG1遺伝子はすでに細胞ゲノムに統合され、対照群と比べ、INSIG1遺伝子のMRNA発現量は597.98倍増加した(P<0.001)。本研究は乳牛のINSIG1遺伝子を安定的に発現する乳腺細胞系を獲得し、INSIG1遺伝子の機能を深く研究するために基礎を築いた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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遺伝子操作  ,  発生と分化  ,  生体の顕微鏡観察法 

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