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J-GLOBAL ID:201702255999688543   整理番号:17A0078059

大腸菌における類の発現について検討した。【JST・京大機械翻訳】

The Expression of Elastin-like Polypeptide Tag in Periplasmic Space of Escherichia coli
著者 (8件):
資料名:
巻: 32  号:ページ: 214-220  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2986A  ISSN: 1002-5464  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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本研究の目的は,大腸菌における周辺蛋白質[I]_(40)(ELASTIN-LIKE POLYPEPTIDE[I]_(40),ELP[I]_(40))の発現を研究することである。発現ベクターベクター6LH/ELP[I]_(40)及びPIG6LH/ELP[I]_(40)+TRXを構築し、それぞれ構築した発現ベクターを宿主菌Eに発現させた。E.COLI BLR(DE3),IPTG誘導発現,可逆的相転移サイクル(INVERSE TRANSITION CYCLING,ITC)技術を用いて蛋白質を精製した。ELP[I]_(40)およびELP[I]_(40)+TRXの相転移温度(TT)を測定し,ELP[I]_(40),ELP[I]_(40)+TRX蛋白質濃度およびNACLの相転移温度への影響を調べた。その結果,ELP[I]_(40),ELP[I]_(40)+TRX蛋白質を3回のITCにより精製した。ELP[I]_(40)とELP[I]_(40)+TRXの10,25,50,75および100ΜMOL/L濃度でのT_Tを測定した。それらは,31.5°C,29°C,27°C,26°C,25°C,31.8°C,29.5°C,27.5°C,26°C,25.5°Cであった。T_Tに及ぼすNACL濃度の影響を研究し,ELP[I]_(40)とELP[I]_(40)+TRXの最終濃度は25ΜMOL/Lであり,NACL濃度は0.25,0.5,0.75,1.00および1.25MOL/Lであった。ELP[I]_(40)の温度は29°Cから24.5°C,22°C,19°C,15°Cおよび11.5°Cに低下し,ELP[I]_(40)+TRXの温度は29.5°Cから25°C,23°C,20.2°C,15.5°Cおよび11.8°Cに低下した。大腸菌周辺の空間で発現するELP[I]_(40)は細胞内で発現する同じ物理化学的性質を持ち、ELPは大腸菌の周辺の空間で発現するタンパク質の分離精製のラベルとして用いることができる。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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