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J-GLOBAL ID:201702256945238307   整理番号:17A0107505

逆転写ウイルスによるマウスマクロファージの感染に対する方法【JST・京大機械翻訳】

Methods for retrovirus infection on mouse primary macrophages
著者 (5件):
資料名:
巻: 43  号:ページ: 551-556  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2002A  ISSN: 1672-352X  CODEN: ANDXB8  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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マクロファージは免疫反応の調節において重要な役割を果たしているが,そのトランスフェクションの困難性はマクロファージに対する免疫反応を調節する分子機構を深く研究している。HEK293T細胞を用いてGFP標識のレトロウイルスベクターをパッケージし、それぞれ異なる分化段階のマクロファージに感染し、細胞の生長状況とGFP陽性細胞の比率を測定することにより、感染時間がウイルス感染効率に与える影響を検討した。結果は,組換えレトロウイルスの効率がマクロファージ分化の初期段階で最も高く,細胞分化と増殖に有意な影響を及ぼさないことを示した。次に,この方法を用いてI型インターフェロン発現に対するMKP5の調節作用を検討した。MKP5を発現する組換えレトロウイルスを構築およびパッケージングすることにより,マクロファージ分化後の1日目に感染を行い,その後,WESTERNハイブリダイゼーションおよびリアルタイム定量的PCR分析を行った。この感染条件を用いて,多くの外因性MKP5の発現を検出するだけでなく,MKP5の過剰発現はLPSによって誘発されるIFNの発現を有意に阻害することがわかった。そのため、マクロファージの分化早期にレトロウイルスを感染させ、外来のタンパク質を有効に発現させ、これらのタンパク分子がマクロファージにおいて免疫反応を調節する機能を研究し、今後の免疫学研究に有効な技術方法を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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著者キーワード (3件):
分類 (1件):
分類
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遺伝子操作 
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