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J-GLOBAL ID:201702260418085803   整理番号:17A0062897

乳牛の円形,伸長,成熟精子細胞における微量RNAの調製と含有量分析【JST・京大機械翻訳】

The Preparation and Quantity Analysis of Trace RNA from Round Spermatids, Elongated Spermatids and Mature Sperm of Dairy Cattle
著者 (6件):
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巻: 47  号:ページ: 1546-1554  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2231A  ISSN: 0366-6964  CODEN: CMHPAI  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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本研究では、乳牛の変形精子細胞の獲得方法を検討し、安定した乳牛の精子RNA抽出システムを確立し、単一精子細胞のRNA含有量の変化を分析することを目的とした。レーザー顕微鏡技術と凍結切片を用いて、乳牛の円形、伸長の精子細胞サンプルを採集し、精巣上体尾部の精子を用いて、成熟精子を獲得し、すでに報告されたマウス、乳牛及びヒト精子のRNA調製法の試みと比較を行った。RNEASY KITの最適乳牛の精子RNAの調製法を得て,円形 RNA ISOLATION KITを用いて,円形と伸長の精子細胞のRNAを調製した。白血球、上皮細胞などの体細胞汚染及びゲノムDNA汚染を除去する逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)の検出方法を選別し、そして精原細胞のRNA含有量に対して単因子分散分析を行った。結果により、レーザー顕微鏡技術は円形、伸長の精子細胞を効果的に捕獲できることが分かった。RNEASY KITにより得られたウシ精子のRNA純度は高く、品質は良く、単一精子のRNA含有量は0.023~0.025PGであった。同時に、精子細胞の変形に伴い、そのRNAの含有量は著しく低下し、その中の円形精子から成熟精子のRNAの含有量は75倍低下した。本研究は、複雑なサンプルのサンプリング、微量RNA細胞の転写酵素の検出と検出などの方面から、精子の発生と変形のメカニズムに関する研究に重要な参考を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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生殖器官 

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