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J-GLOBAL ID：201702261134724962   整理番号：17A0068907

ヒト免疫不全ウイルス-1 VPR遺伝子干渉RNAベクターの構築とスクリーニングの体外研究【JST・京大機械翻訳】

Construction and screening of human immunodeficiency virus-1 vpr gene RNA interference vector in vitro

著者 (8件)： Huang Na (Department of Infectious Diseases,Second Xiangya Hospital, Central South University) ,  Zhang Quan (Department of Infectious Diseases,Second Xiangya Hospital, Central South University) ,  He Yan (Department of Infectious Diseases,Second Xiangya Hospital, Central South University) ,  Zhou Quan (Department of Infectious Diseases,Second Xiangya Hospital, Central South University) ,  Gong Guozhong (Department of Infectious Diseases,Second Xiangya Hospital, Central South University) ,  Zheng Yuhuang (Department of Infectious Diseases,Second Xiangya Hospital, Central South University) ,  Xiao Xinqiang (Department of Infectious Diseases,Second Xiangya Hospital, Central South University) ,  Xu Zhengyu (Department of Infectious Diseases,Second Xiangya Hospital, Central South University)
資料名： Zhonghua Chuanranbing Zazhi  (Zhonghua Chuanranbing Zazhi)
巻： 34  号： 7  ページ： 400-403  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2333A  ISSN： 1000-6680  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】HIV-1VPR遺伝子に対する低分子干渉RNA(SIRNA)の干渉フラグメントをスクリーニングし,HIV-1 遺伝子に対するSIRNAの干渉効率を調査する。【方法】HIV-1 VPR標的に対する2つのオリゴヌクレオチドフラグメントをSIRNA設計に従って合成し,HIV-1 VPRプラスミドを含むHEK293T細胞にトランスフェクトした。2つの実験群(SIRNA56,SIRNA160群),1つの陰性対照群(NC群),ブランク対照群(CON群)とした。全RNAと蛋白質の抽出を行い,リアルタイムPCRとウェスタンブロット法を用いて,核酸と蛋白質のレベルからHIV-1 VPRの標的フラグメントを確認した。培養上清におけるIL-17とIFN-ΓのレベルをELISAによって検出した。【結果】DNA配列決定の結果は,哺乳類細胞細胞-U6の構築に成功したことを示した。NEO-VPR-56/160(SIRNA56とSIRNA160)発現ベクターを作製した。SIRNA56とSIRNA160の干渉はHIV-1 VPR遺伝子のMRNAレベルの発現をそれぞれ69.0%と76.1%低下させた。蛋白質発現レベルは,それぞれ76.3%と86.5%減少した。IL-17の濃度は,CON群,NC群,SIRNA56群およびSIRNA160群において,それぞれ(1.936±0.415),(1.815±0.393),(1.935±0.356)および(2.034±0.421)PG/MLであった。Γインターフェロンは,それぞれ(1.673±0.234),(1.648±0.332),(2.169±0.362)および(2.301±0.4125)PG/MLであった。結論:PRNAT-U6を発現する。NEO-VPR-56/160(SIRNA56とSIRNA160)のプラスミドの構築に成功し、異なる遺伝子断片のSIRNAに対してHIV-1 VPRの発現レベルを下げることができる。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： プラスミド ,  ELISA ,  siRNA ,  *ベクター ,  リアルタイムPCR法 ,  HIV1 ,  *HIV【ウイルス】 ,  *スクリーニング ,  ウェスタンブロット法
準シソーラス用語： 蛋白質発現 ,  発現ベクター ,  哺乳類細胞 ,  DNA配列 ,  インターロイキン17 ,  HEK293T細胞 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： Human immunodeficiency virus-1 ,  Genes ,  vpr ,  RNA interference ,  Interleukin-17 ,  Interferon type II

分類 (4件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  遺伝子発現  (EC02040Q) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J) ,  細胞生理一般  (EF02010S)

タイトルに関連する用語 (7件)： ヒト免疫不全ウイルス ,  vpr遺伝子 ,  干渉RNA ,  ベクター ,  構築 ,  スクリーニング ,  研究