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J-GLOBAL ID：201702261229420913   整理番号：17A0110216

三 STINGの外因性遺伝子クローニングと原核発現【JST・京大機械翻訳】

Cloning and prokaryotic expression of Sanhuang chicken STING extracellular domain gene

著者 (9件)： Cao Yanjie (College of Animal Science and Technology, Guangxi University) ,  He Yining (College of Animal Science and Technology, Guangxi University) ,  Tang Ning (College of Animal Science and Technology, Guangxi University) ,  Wang Haiyong (College of Animal Science and Technology, Guangxi University) ,  Zhang Zhipeng (College of Animal Science and Technology, Guangxi University) ,  Xie Zhiwen (College of Animal Science and Technology, Guangxi University) ,  Wei Ping (College of Animal Science and Technology, Guangxi University) ,  Wei Tianchao (College of Animal Science and Technology, Guangxi University) ,  Mo Meilan (College of Animal Science and Technology, Guangxi University)
資料名： Nanfang Nongye Xuebao  (Nanfang Nongye Xuebao)
巻： 47  号： 8  ページ： 1401-1405  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2960A  ISSN： 2095-1191  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： [目的]ニワトリインターフェロン遺伝子刺激タンパク質(STING)の外因性遺伝子をクローニングし、原核発現を行い、STINGタンパク質の生物学的機能を理解し、鳥類の自然免疫機序を検討するために基礎を築く。【方法】RT-PCR法を用いてニワトリのSTING遺伝子を増幅し,原核生物発現ベクターPGEX-4T-1と結合し,組換え発現プラスミドを構築し,BL21(DE3)コンピテント細胞に形質転換した。IPTGにより誘導後,12%SDS-PAGEとWESTERN BLOTTING分析を行った。【結果】三 外の外の遺伝子の長さは951BPであり,原核生物発現ベクターPGEX-4T-Lとの組換え発現プラスミドPGEX4T-1-STINGの構築に成功した。BL21(DE3)に形質転換した後、1.0MMOL/L IPTGで4時間発現させ、12%SDS-PAGE電気泳動により、GSTタグ約62KUの融合タンパク質を得た。抗GSTポリクローナル抗体を用いてWESTERN BLOTTING鑑定を行い、約62KUで明らかなタンパク質バンドが見られ、目的タンパク質の原核発現が正確で、しかも特異性が高いことを示した。【結語】サンホアンの末梢血リンパ球からクローン化されたSTING遺伝子は,原核細胞において効率的に発現し,精製した融合蛋白質はニワトリのSTINGポリクローナル抗体の調製に用いることができる。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 融合タンパク質 ,  RT-PCR法 ,  タンパク質 ,  ポリクローナル抗体 ,  原核生物 ,  クローン ,  形質転換 ,  *遺伝子クローニング ,  原核細胞 ,  自然免疫 ,  プラスミド ,  *遺伝子
準シソーラス用語： 組換蛋白質発現 ,  発現ベクター ,  *クローニング , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： Sanhuang chicken ,  stimulator of interferon genes (STING) ,  cloning ,  prokaryotic expression

分類 (4件)： 分子遺伝学一般  (EC02010J) ,  遺伝子の構造と化学  (EC02020U) ,  遺伝子発現  (EC02040Q) ,  蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N)

タイトルに関連する用語 (3件)： STING ,  遺伝子クローニング ,  発現