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J-GLOBAL ID:201702261267255227   整理番号:17A0202334

馬1型(EHV-1)GC蛋白質の原核発現とその免疫原性解析【JST・京大機械翻訳】

Prokaryotic expression and analysis of the immunogenicity of the gC gene of equine herpes virus 1
著者 (5件):
資料名:
巻: 11  号: 10  ページ: 876-880  発行年: 2016年 
JST資料番号: C3057A  ISSN: 1673-5234  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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【目的】馬鼻は,ヘルペスウイルス1型(EHV-1)と4型(EHV-4)によって引き起こされるが,それらの間には広範囲の抗原交差反応があり,2型ウイルス感染の鑑別診断に困難をもたらす。EHV-1 GC糖蛋白(GC1)は凝集の凝集能を有するが,EHV-4 GC糖蛋白質はこの特性を持たないため,精製したGC蛋白質は馬鼻肺炎の鑑別診断法を確立し,さらにヘルペスウイルス感染の免疫分子機構を研究するのに役立つ。方法:ウイルスゲノムDNAを抽出し、特異的プライマーを用いて目的遺伝子断片を増幅し、正確に増幅された遺伝子断片及びクローンベクターPET30A(+)に対してそれぞれBAMH IとECOR Iを二重消化した。標的遺伝子フラグメントを発現ベクターPET30A(+)に挿入し,組換えプラスミドPET30A-GC1を構築した。組換えプラスミドPET30A-GC1を大腸菌発現株ROSSETAに形質転換し,IPTGにより誘導し,発現蛋白質を発現させ,発現条件を最適化した。発現産物をSDS-PAGEとウエスタンブロットによって分析した。【結果】組換えプラスミドはIPTGによって誘発された60KUの標的蛋白質を発現し,それは25°Cでの可溶性発現を示し,誘導温度が30°Cのときに封入体の形で発現した。封入体を電気泳動後に精製し,精製効率は相対的に高く,純度は高かった。ウエスタンブロットは,目的-1とEHV-2によってウマ血清を同定することができることを示した。結論:EHV-1 GC遺伝子発現ベクターの構築に成功し、その発現産物は反応性があり、さらにEHV感染の分子診断を展開するために基礎を築いた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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馬 
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