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J-GLOBAL ID：201702264268345401   整理番号：17A0528927

乳腺上皮細胞におけるSREBP1蛋白質の発現位置とSCD1遺伝子プロモーターの転写制御【JST・京大機械翻訳】

Expression and Localization of Bovine SREBP1 Protein and Regulation of the Transcription of SCD1 Promoter in Bovine Mammary Epithelial Cell

著者 (7件)： Han Liqiang (College of Animal Science and Veterinary Medicine, Henan Agricultural University,Key Laboratory of Animal Biochemistry and Nutrition of Ministry of Agriculture) ,  Wang Yueying (College of Animal Science and Veterinary Medicine, Henan Agricultural University,Key Laboratory of Animal Biochemistry and Nutrition of Ministry of Agriculture) ,  Wang Linfeng (College of Animal Science and Veterinary Medicine, Henan Agricultural University,Key Laboratory of Animal Biochemistry and Nutrition of Ministry of Agriculture) ,  Zhu Heshui (College of Animal Science and Veterinary Medicine, Henan Agricultural University,Key Laboratory of Animal Biochemistry and Nutrition of Ministry of Agriculture) ,  Zhong Kai (College of Animal Science and Veterinary Medicine, Henan Agricultural University,Key Laboratory of Animal Biochemistry and Nutrition of Ministry of Agriculture) ,  Chu Beibei (College of Animal Science and Veterinary Medicine, Henan Agricultural University,Key Laboratory of Animal Biochemistry and Nutrition of Ministry of Agriculture) ,  Yang Guoyu (College of Animal Science and Veterinary Medicine, Henan Agricultural University,Key Laboratory of Animal Biochemistry and Nutrition of Ministry of Agriculture)
資料名： Zhongguo Nongye Kexue  (Zhongguo Nongye Kexue)
巻： 49  号： 24  ページ： 4797-4805  発行年： 2016年 
JST資料番号： W1459A  ISSN： 0578-1752  CODEN： CKNYAR  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： [目的]ステロール調節エレメント結合タンパク質1(SREBP1)は核転写因子として、細胞脂肪合成酵素遺伝子の発現に対して重要な調節作用を発揮する。本研究の目的は,乳牛1遺伝子プロモーターの転写調節におけるSREBP1の転写調節機構を研究することであり,それは,標的遺伝子の転写調節機構を明らかにするための理論的基礎を提供する。【方法】ホルスタイン1遺伝子のコード配列を,ウシの乳腺組織のCDNAを鋳型として使用し,PCDNA3.1-SREBP1発現ベクターを,組換え酵素とPCDNA3.1ベクターによって構築した。構築したベクターを配列決定し、プラスミドを抽出し、乳牛乳腺上皮細胞にトランスフェクションした。EIF1遺伝子のMRNA発現は,内部3K遺伝子によって検出された,そして,定量的PCRによって検出された。免疫蛍光法を用いて、SREBP1を標識し、DAPI染色核細胞を用いて、レーザー共焦点によりSREBP1タンパクの亜細胞定位を観察した。異なる調節要素を含むSCD遺伝子プロモーターをトランスフェクションし、同時に1.0ΜG PCDNA3.1-SREBP1を処理とし、ルシフェラーゼレポーター遺伝子システムはプロモーター活性を分析した。それぞれ,0.25,0.5および1ΜGのPCDNA3.1-SREBP1ベクターをトランスフェクションし,PGL3-SCD2およびPGL3-SCD3プロモーター活性とSREBP1の間の用量依存性を分析した。【結果】PCR産物は,それぞれ,1BP,363BP,および900BPであり,PCDNA3.1-SREBP1発現ベクターを得て,制限酵素消化と配列決定によって確認した。1つのナンセンス突然変異を除いて、標準配列と完全に一致し、配列全体の長さは3BPに達した。PCDNA3.1-SREBP1ベクターを乳腺上皮細胞にトランスフェクションした後、REAL-TIME PCR検査により、空ベクター対照群と比較し、SREBP1遺伝子のMRNA発現倍数は130.4倍増加した(P<0.001)。レーザー共焦点顕微鏡観察により、DAPI染色の細胞核は青色で、免疫蛍光標識のSREBP1は緑色であり、両者は融合後にシアンを呈し、乳腺上皮細胞核に位置することが分かった。プロモーター活性の検出により,PGL3-SCD1およびPGL3SCD2と比較して,SREBP1処理はPGL3-SCD3およびPGL3-CD4プロモーター活性を有意に増加させた(P<0.001)。対照群と比較して,0.25-1ΜGのPCDNA3.1-SREBP1で処理した後に,PGL3-SCD2のプロモーター活性は,それぞれ1.0倍と0.7倍増加した。PGL3-SCD3のプロモーター活性は59.81%から108.43%まで増加し(P<0.001),それらの間には用量依存性があり,SCD2とSCD3プロモーターの間の主要な構造的差異は5これらの配列は,SREBP1がSCD遺伝子プロモーターを調節する結合配列である可能性があると推測される。【結語】クローン1遺伝子の発現ベクターをクローン化し,SREBP1蛋白質は主に乳腺上皮細胞核に位置し,SREBP1はSRE1遺伝子プロモーターの転写を促進することができる。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： トランスフェクション ,  乳牛 ,  定量的PCR法 ,  DNA制限酵素 ,  ベクター ,  レポーター遺伝子 ,  蛍光抗体法 ,  *乳腺 ,  クローン ,  プラスミド ,  *プロモーター領域 ,  蛍光標識 ,  プロモーター活性 ,  *ステロール調節エレメント結合タンパク質1 ,  バイオアッセイ
準シソーラス用語： 用量依存性 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： bovine ,  SREBP1 ,  mammary epithelial cell ,  subcellular localization ,  gene regulation

分類 (1件)： 遺伝子発現  (EC02040Q)

タイトルに関連する用語 (7件)： 乳腺上皮細胞 ,  SREBP1 ,  蛋白質 ,  発現 ,  SCD1 ,  遺伝子プロモーター ,  転写制御