エンテロトキシン黄色ぶどう球菌の海とseb遺伝子を検出するための側方流動アッセイと併用した多重ループ媒介等温増幅【Powered by NICT】

Yin H.Y.; Fang T.J.; Wen H.W.

文献

J-GLOBAL ID：201702264782338482 整理番号：17A0657575

エンテロトキシン黄色ぶどう球菌の海とseb遺伝子を検出するための側方流動アッセイと併用した多重ループ媒介等温増幅【Powered by NICT】

Combined multiplex loop-mediated isothermal amplification with lateral flow assay to detect sea and seb genes of enterotoxic Staphylococcus aureus

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巻： 63 号： 1 ページ： 16-24 発行年： 2016年07月
JST資料番号： C0081C ISSN： 0266-8254 CODEN： LAMIE7 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：原著論文発行国：イギリス (GBR) 言語：英語 (EN)

ぶどう球菌エンテロトキシン(SEs)は世界的に食中毒の最も一般的な原因であり,症状を誘導することができる,下痢,おう吐,腹部痙攣である。このように,本研究の目的は,黄色ぶどう球菌の海とseb遺伝子を同時検出するための側方流動アッセイ(m LAMP/LFA)と組み合わせた多重LAMP法を開発することである。sea遺伝子のアンプリコンをジゴキシゲニン(Dig)とビオチンで標識したseb遺伝子のそれはフルオレセインイソチオシアナート(FITC)とビオチンで標識した。これらのアンプリコンを検出試薬としてN.Avidin標識化金ナノ粒子を用いた多重LFAを用いて検出した。最適化後,この方法の検出限界は10~2CFU ml~ 1Staph.aureus,マルチプレックスPCRの十分の1であった。このアッセイは他のエンテロトキシンStaph.aureus株または他の食品病原体の検出における交差反応を示さなかった。6H濃縮の後,この開発したアッセイは,牛乳,りんごジュース,チーズ及びイネのStaph.aureusの1CFU ml~ 1を検出した。開発したm LAMP/LFA方法は高価な装置を必要とせず,8労働時間内で完全に実装することができる。それ故,この方法は迅速にスクリーニングブドウ球菌エンテロトキシンAおよび/またはぶどう球菌エンテロトキシン食品試料中のStaph.aureusをB産生の有効な手段を提供することができる。研究の意義と影響:黄色ぶどう球菌は世界的に主要な食品媒介病原体の一つであり,そのぶどう球菌エンテロトキシンAとBは食中毒に強く関連している。同時に食品試料中のStaph.aureusの海とseb遺伝子を検出するための側方流動アッセイ(m LAMP/LFA)と組み合わせた多重ループ媒介等温増幅法(LAMP法)を開発した。アッセイは使いやすさ特徴を有する良好な特異性と感度を有し,オンサイト検出に理想的である。Copyright 2017 Wiley Publishing Japan K.K. All Rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

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微生物検査法

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