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J-GLOBAL ID:201702264851026213   整理番号:17A0124875

in vivo雄性生殖系列幹細胞のレンチウイルス形質導入によるトランスジェニックマウスの発生のための効率的な戦略【Powered by NICT】

An efficient strategy for generation of transgenic mice by lentiviral transduction of male germline stem cells in vivo
著者 (8件):
資料名:
巻:号:ページ: 158-166  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2841A  ISSN: 1674-9782  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 英語 (EN)
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背景:雄性生殖系列幹細胞(MGSCs)は,精巣組織における生殖細胞の亜集団である。MGSCsした精子に分化することが可能であり,遺伝子導入動物を作出するためゲノム操作のための完全な標的である。【方法】本研究では,レンチウイルスに基づくベクターを用いたin vivo MGSCsの形質導入によりトランスジェニックマウスの生産のプロトコルを最適化した。増強緑色蛍光蛋白質(eGFP)導入遺伝子の発現を駆動するEF-1またはCMVプロモーターのどちらかを持つ組換レンチウイルスベクターは精細管またはチューブ間空間7日齢と28日齢マウス精巣のに注入した。5または6週間術後では,これら前創始者は野生型C57BL/6J雌マウス(1.5~20か月齢)と交配した。F1世代の【結果】六十七%,F2子孫の55.56%がPCR解析によるEF-1プロモーターの制御下でeGFP導入遺伝子陽性であった。トランスジェニック子は注射部位と年齢非依存様式で生成した。導入遺伝子の発現は導入遺伝子駆動にCMVプロモーターを含むレンチウイルスベクターに由来する子孫を用いdisplaidであったが,EF-1プロモーターの下で導入遺伝子を用いたレンチウイルスベクター由来の子孫における抑制されまたは検出されなかった。導入遺伝子のプロモーター領域におけるDNAのメチル化レベルはCMVプロモーターよりもEF-1プロモーターを用いて導出された試料レンチウイルスベクターではるかに高く,eGFP導入遺伝子はin vivoでのDNAメチル化により発現抑制されることを示唆した。【結論】は本研究では,特異的プロモーターを持つレンチウイルスベクターを用いたin vivo MGSCsの形質導入によるトランスジェニックマウスの作製のための有効な戦略をここで報告した,トランスジェニック子孫は注射部位と年齢非依存様式で得られた。このプロトコルは他の動物種に適用した,農業及び生物医学分野における動物遺伝子導入の進歩をもたらした。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【Powered by NICT】
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分類 (2件):
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JSTが定めた文献の分類名称とコードです
遺伝子操作  ,  遺伝子発現 

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