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J-GLOBAL ID:201702272080311123   整理番号:17A0450298

局所ミクロ粘性を監視するためのハイブリッドセンサを用いたSNAP-タグ融合蛋白質の特異的かつ無洗浄用標識【Powered by NICT】

Specifically and wash-free labeling of SNAP-tag fused proteins with a hybrid sensor to monitor local micro-viscosity
著者 (4件):
資料名:
巻: 91  ページ: 313-320  発行年: 2017年 
JST資料番号: D0173C  ISSN: 0956-5663  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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細胞内微小環境の主要な要因の一つとして,粘度は蛋白質の機能に影響する。蛋白質の局所ミクロ粘性を検出するために,それは蛋白質に特異的に標的の粘度センサを適用する前提条件である。しかし,全ての報告された小分子プローブは,全細胞またはオルガネラの生物学的流体の巨視的粘性のセンシング/イメージングに適したばかりである。この目的のために,著者らはSNAP-タグ融合蛋白質の局所ミクロ粘性の特異的検出のための,粘度に敏感なほう素-ジピロメテン(BODIPY)分子回転子(BDP V)を結ぶO~VIベンジルグアニン(BG)によるBDP V BGをハイブリッドセンサを開発した。高い標識特異性を確認するためにin vitroでセンサとSNAPタグ蛋白質間の反応効率を測定し,計算した。も標識反応はロータのための53倍蛍光増強,無視できるバックグラウンド蛍光と洗浄センサとしてそれを適格になることを見出した。局所粘度の変化への蛋白質標識センサ(BDP V SNAP)の高い感度は,蛍光寿命の増加を検出することにより評価した。さらに,センサBDP V BG,二SNAP-タグ融合蛋白質(核ヒストンH2BとミトコンドリアCOX8A)を発現する細胞の高特異的標識を達成した。二光子励起蛍光寿命イメージングは,SNAP-タグ融合二蛋白質近くの微小粘度は異なる明らかにした。三核標的薬剤により誘導されるアポトーシスにおけるSNAP-タグ融合ヒストン蛋白質の局所ミクロ粘性の異なる変化も初めて特性化した。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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分類 (2件):
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生化学的分析法  ,  バイオアッセイ 

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