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J-GLOBAL ID:201702273299359105   整理番号:17A0256182

アデノシンは,乳酸 酵母において発現した。【JST・京大機械翻訳】

Expression of adenosine monophosphate deaminase in Kluyveromyces lactis
著者 (7件):
資料名:
巻: 43  号: 11  ページ: 2341-2352  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2731A  ISSN: 0253-2654  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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[目的]本研究の目的は,暗号 LACTIS GG799における鼠灰Lian 源由来のアデノシン遺伝子の構成的発現を研究することであった。【方法】鼠灰Lian(STREPTOMYCES MURINUS)由来のアデノシン(AMP)遺伝子をコドン最適化後に鋳型として用い,特異的プライマーを設計し,PCRによってAMP-遺伝子遺伝子を増幅した。PKLAC1をベクターとして組換え発現プラスミドPKLAC1-OPT-AMPDを構築し、SAC IIで線形化した後、方法をKに移した。組換え株を,LACTIS GG799によってスクリーニングし,酵素活性を測定し,HIS TRAP(TM)HPによって精製し,そして,組換え菌の発酵培地を最適化した。[結果]AMP遺伝子のコドン最適化を行い、組換えKを構築した。LACTOCOCCUS GG799/はPKLAC1-OPT-AMPDを構成し,構成的発現を実現し,コドン最適化後のAMPデアミナーゼ活性は586±50U/MLに増加した。SDS-PAGEの結果,精製したAMPデアミナーゼは単一バンドであり,蛋白質サイズは約60KDであった。最適発酵培地は(G/L)であった。グルコース40,ペプトン20,酵母エキス15,NACL8,KCL10,MGSO_4,2,30°C,200R/MINで120時間発酵したとき,酵素活性は2±60U/MLに達した。[結論]コドン最適化後のアデノシン遺伝子の乳酸 酵母GG799内の構成的発現を実現し、アデノシン酸脱AnMeiの組換え高効率発現と発酵生産を実現するために、有益な探索を行った。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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