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J-GLOBAL ID：201702273487589519   整理番号：17A0675850

真核生物発現ヒト呼吸器ウイルスF蛋白質の精製方法【JST・京大機械翻訳】

Purification of the fusion protein of human respiratory syncytial virus expressed in eukaryotic expression vector

著者 (9件)： LU Yanyan (Department of Immunology, Anhui Medical University) ,  HE Jinsheng (Department of Immunology, Anhui Medical University) ,  ZHANG Mei (Department of Immunology, Anhui Medical University) ,  YU Jiemei (Department of Immunology, Anhui Medical University) ,  XIE Can (Department of Immunology, Anhui Medical University) ,  YUAN Yuan (Department of Immunology, Anhui Medical University) ,  XUE Shaoli (安徽医科大学生物技術教研室) ,  SONG Wei (Department of Immunology, Anhui Medical University) ,  ZHENG Xianxian (Department of Immunology, Anhui Medical University)
資料名： Mianyixue Zazhi  (Mianyixue Zazhi)
巻： 24  号： 2  ページ： 188-191  発行年： 2008年 
JST資料番号： C2408A  ISSN： 1000-8861  CODEN： MIZAED  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】ヒト呼吸不全ウイルス(RSV)融合蛋白質(FUSION)の融合蛋白質(FUSION)を発現させ,蛋白質の精製と純度を測定する。方法:コード化Fタンパク質の遺伝子配列に基づき、プライマーを設計し、PCR法により3′端帯HISタグのF遺伝子配列を増幅し、PGEM-Tベクターにクローニングし、核酸配列分析を行った後、PCDNA3.1(+)真核発現ベクターにクローニングした。COS-7細胞を,リポフェクタミン2000によって形質移入し,72時間後に,ウエスタンブロットによって標的蛋白質の発現を検出した。COS-7細胞の蛋白質をNIアフィニティークロマトグラフィーによって精製し,精製蛋白質の純度をキャピラリー電気泳動によって分析した。結果:核酸配列分析はHISタグ付きのRSV F遺伝子配列が得られ,ナンセンスが発生しなかったことを確認した。COS-7細胞にトランスフェクトした後、WESTERN BLOT法によりF蛋白の特異的バンドを検出し、純度は99%以上に達した。結論:真核生物発現RSV Fタンパク質の精製方法を確立し、RSV Fタンパクの調製条件及びモノクローナル抗体及び診断試薬の更なる最適化に基礎を築いた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *ウイルス ,  キャピラリー電気泳動 ,  ヌクレオチド配列 ,  *タンパク質 ,  *真核生物 ,  ウェスタンブロット法 ,  PCR法 ,  純度 ,  *ヒト ,  ベクター ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  融合タンパク質 ,  トランスフェクション
準シソーラス用語： COS7細胞 ,  遺伝子配列 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： Human respiratory syncyfial virus ,  F gene ,  Eukaryotic expression ,  Purification

分類 (2件)： 蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N) ,  遺伝子の構造と化学  (EC02020U)

タイトルに関連する用語 (7件)： 真核生物 ,  発現 ,  ヒト ,  呼吸器 ,  ウイルス ,  F蛋白質 ,  精製