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J-GLOBAL ID:201702274738448882   整理番号:17A0109819

レイシ属霜疫Mei巣式のPCRとLAMP検出法の確立【JST・京大機械翻訳】

Establishment of Nested- PCR and LAMP Assays for Detection of Peronophythora litchii
著者 (6件):
資料名:
巻: 24  号:ページ: 919-927  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2715A  ISSN: 1674-7968  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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レイシ属霜疫Mei(PERONOPHYTHORA LITCHII)によって引き起こされたレイシ属霜疫Mei病はレイシ属(LITCHI CHINENSIS)の生産における重要な病害であり、霜疫Meiの迅速かつ正確な検出方法を確立した。この疾患の早期診断と適時の予防は非常に重要である。本研究では、レイシ(GTP)結合タンパク質遺伝子(GTP-BINDING PROTEIN GENE, YPT1)を標的配列とし、特異的プライマーを設計した。入れ子PCRとループ媒介等温増幅法(LOOP-MEDIATED ISOTHERMAL AMPLIFICATION,LAMP)の2種類の検出方法を確立し、そして特異性と敏感性の検証を行った。特異的検出により、異なる由来の21個のレイシ属菌株はPCR増幅により249BPの特異性バンドを獲得し、同時に、カルセイン指示薬の作用下で、LAMP検出は緑色を示し、増幅産物は2.0%アガロースゲル電気泳動により特有の台形バンドを示した。その他の13種類の異なる卵種及び8種類のよく見られる病原真菌の42株はいずれもこれらの現象が観察されなかった。感度検出により,特異的プライマーPVYF1/PVYR1と疫病1/F/YPH1を通1F/YPH2Rにより増幅し,その検出感度はDNAレベルで100FG/L25ΜLに達した。従来のPCRと比較して1000倍増加したが,LAMP法の検出感度は入れ子PCRの10倍であった。本研究では、従来のPCR、入れ子PCR及びLAMP法を用いて、福建省のレイシ属の典型的な症状及び疑わしい症状を採集したレイシの葉或いは果実を検出し、従来の分離方法を用いて検証を行った。結果は,従来のPCR,入れ子PCRおよびLAMP法の陽性検出率が,それぞれ/%(77.3%),20%(90.9%)および21%(95.5%)であることを示した。PPによって採取した25のサンプルの中で,従来のPCR,入れ子PCRおよびLAMP法の陽性検出率は,それぞれ17%(88.2%),17%(94.1%)および17%(100%)であった。LAMP方法は検出効率を明らかに向上させ、しかも検査プログラムの便利性を持ち、必要な設備は簡単かつ肉眼で判断結果の優位性があり、基礎部門及び田間Liの迅速検出に適している。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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微生物検査法  ,  菌類による植物病害 
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