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J-GLOBAL ID:201702276978592850   整理番号:17A0350175

乳癌におけるP90リボソームS6蛋白質キナーゼ4の相互作用蛋白質を,親和性精製と質量分析によってスクリーニングした。【JST・京大機械翻訳】

Screening of proteins interacting with RSK4 in breast cancer by affinity purification and liquid chromatography/mass spectrometry
著者 (8件):
資料名:
巻: 26  号:ページ: 581-588  発行年: 2016年 
JST資料番号: C3056A  ISSN: 1007-3639  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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背景と目的;P90リボソームS6プロテインキナーゼ4遺伝子(RIBOSOMAL S6 KINASE 4 GENE、RSK4)は癌抑制遺伝子として、細胞の増殖、遊走を抑制し、細胞のアポトーシスを誘導することができるが、それと連携して機能を発揮する相互作用タンパクはまだ不明である。この研究では,乳癌細胞株MDA-MB-231におけるRSK4相互作用蛋白質を,FLAGタグの精製技術と質量分析によってスクリーニングした。方法;RSK4の全長とFLAGタグを含む真核生物発現ベクターPCDNA3.1/EGFP-RSK4-FLAGを構築し、それをMDA-MB-231乳癌細胞株にトランスフェクションし、72H後に細胞蛋白を収集した。リアルタイム蛍光定量ポリメラーゼ連鎖反応(REAL-TIME FLUORESCENT QUANTITATIVE POLYMERASE REACTION, RTFQ-PCR)とタンパク質[質]ウェスタンブロット法(WESTERN BLOT)を用いてRSK4の発現状況を測定した。ラベル4蛋白質をラベル化によって精製した。液体4の相互作用蛋白質をLC/MS/MS/MS/MS/MS/MSによって同定した。生物情報学的方法(GO分析とIPA分析)により相互作用蛋白質とRSK4との相互作用機構を解析した。【結果】;ラベル/トレオニン蛋白質キナーゼ38(STK38)/セリン/トレオニン蛋白質キナーゼ38((-PROTEIN KINASE 38-LIKE,STK38L),MOBMOB2(PRMT2),蛋白質アルギニンNメチルトランスフェラーゼ5(PRMT5)などの24個のRSK4相互作用蛋白質を,タグ精製と質量分析によって同定した。同定された相互作用蛋白質についてバイオインフォマティクス解析を行い,RSK4相互作用蛋白質がアポトーシスや細胞遊走運動などを含む多様な生物シグナル伝達経路に関与していることを示唆した。結論;親和4の相互作用蛋白質を,親和性精製技術によって同定し,そして,RSK4は,乳癌細胞のアポトーシスおよび移動に関連する生物学的制御ネットワークを得るために,バイオインフォマティクス解析によって得た。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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細胞生理一般  ,  抗腫よう薬の基礎研究 

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