機能性炭素量子ドットに基づくグリコシダーゼのための普遍的な蛍光分析戦略:In vitroおよび生細胞でのβ-ガラクトシダーゼ活性検出【Powered by NICT】

Tang Cong; Zhou Jin; Qian Zhaosheng; Ma Yanyan; Huang Yuanyuan; Feng Hui

文献

J-GLOBAL ID：201702278233074577 整理番号：17A0453585

機能性炭素量子ドットに基づくグリコシダーゼのための普遍的な蛍光分析戦略:In vitroおよび生細胞でのβ-ガラクトシダーゼ活性検出【Powered by NICT】

A universal fluorometric assay strategy for glycosidases based on functional carbon quantum dots: β-galactosidase activity detection in vitro and in living cells

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資料名：
巻： 5 号： 10 ページ： 1971-1979 発行年： 2017年
JST資料番号： W2382A ISSN： 2050-750X CODEN： JMCBDV 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：原著論文発行国：イギリス (GBR) 言語：英語 (EN)

グリコシダーゼのための高感度アッセイの開発はそれらの機能を理解し,関連疾患を検出容易と潜在的な新しい薬物をスクリーニングするために重要な意義がある。本研究では,複合ホスト-ゲスト認識と特異的静的消光-誘起シグナル伝達機構を介した機能的炭素量子ドットに基づくグリコシダーゼ酵素と阻害剤スクリーニングのための普遍的分析戦略を開発した。この検出戦略は次の事実の観点から確立されている(1)完全なホストとしてのβ-シクロデキストリンはその疎水性と正しいサイズ整合空洞のためにp-ニトロフェノールと関連する選択的に,これはホスト-ゲスト認識によるβ-シクロデキストリンとp-ニトロフェノールの間の特異的結合を与えた。(2)β-シクロデキストリン修飾炭素量子ドット(β CD CQDs)とp-ニトロフェノール間の包接複合体の形成は静的消光機構のために高い消光効率と蛍光消光をもたらす。基質としてp-ニトロフェノールの複合糖質は急速に特異的グリコシダーゼの存在下で対応するグリコースおよびp-ニトロフェノールに加水分解することができ,得られたp-ニトロフェノールは,ホスト-ゲスト相互作用と静的消光蛍光信号の変化を誘導する。種々のグリコシダーゼ酵素の活性は同じ方法で評価できる限りグリコシル化基質のグリコシル単位を変化させた。ここでは,原発性卵巣癌の分子標的として作用することができるので,提案した検出戦略の適用性を示すための例としてβ-ガラクトシダーゼを採用した。β-ガラクトシダーゼレベルと蛍光変化の線形相関の項におけるβ-ガラクトシダーゼ活性の高感度アッセイは低い検出限界0.6UL~( 1)を確立した。阻害剤スクリーニングの機能もβ-ガラクトシダーゼ阻害剤としてのD-ガラクタールを用いて評価し,陽性結果は潜在的阻害剤への可能性を示した。もナノプローブは優れた生体適合性を有し,卵巣癌細胞における細胞内β-ガラクトシダーゼレベルを敏感にモニタできることを示した。グリコシダーゼ活性に対する一般的な検出方法を提供する,生きている細胞における酵素レベルをモニタリングの適用性を示し,蛍光診断における蛍光プローブを拡大する。Copyright 2017 Royal Society of Chemistry All Rights reserved. Translated from English into Japanese by JST【Powered by NICT】

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製剤一般 , 固体デバイス製造技術一般

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