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J-GLOBAL ID:201702278950000922   整理番号:17A0108540

鶏5蛋白質のIN VITRO発現とモノクローナル抗体の調製【JST・京大機械翻訳】

In vitro expression of chicken interferon-induced protein with tetratricopeptide repeats 5 (IFIT5) and preparation of its monoclonal antibody
著者 (6件):
資料名:
巻: 46  号:ページ: 1087-1093  発行年: 2016年 
JST資料番号: C3087A  ISSN: 1673-4696  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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ニワトリ5(CHIFIT5)蛋白質は抗ウイルス免疫において重要な役割を果たす。その具体的な作用機序を解明するため、本研究では、伝染性ファブリキウス嚢病ウイルス(INFECTIOUS BURSAL DISEASE VIRUS,IBDV)がDF-1細胞に感染した後、RT-PCR法によりCHIFIT5遺伝子を増幅した。それをPET-28A(+)原核発現ベクターに発現させ、精製した組換えCHIFIT5蛋白質を用いてマウスを免疫した後、細胞融合技術により抗抗5タンパク質を安定的に分泌できる単クローン抗体細胞株を選別した。結果は,増幅5遺伝子のサイズが1BPであり,原核細胞で発現した組換えCHIFIT5蛋白質が約58KUであることを示した。ウエスタンブロット法により,4つのモノクローナル抗体が組換えCHIFIT5蛋白質,IBDV5細胞,MYC5蛋白質,およびMYC-CHIFIT5真核細胞において免疫反応を起こすことを示した。しかし,間接免疫蛍光(IFA)検出は陰性であった。抗体サブクラス分析の結果は,4つの細胞株によって分泌されたモノクローナル抗体がすべてIGG2Aサブクラスであり,軽鎖がΚ鎖であることを示した。これらの結果は,ニワトリのIFIT蛋白質の生物学的特性の研究のための基礎を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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著者キーワード (4件):
分類 (2件):
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抗原・抗体・補体の生産と応用  ,  免疫療法薬・血液製剤の基礎研究 
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