中華1遺伝子のクローニング,原核発現および機能同定を,中華 トリプトファンのトリプトファン1遺伝子のクローニングによって行った。【JST・京大機械翻訳】

Liu Yanfang; Chen Xi; Ling Hong; Liu Dongchun; Xia Mingyu; Wang Dong

文献

J-GLOBAL ID：201702285428368865 整理番号：17A0064514

中華1遺伝子のクローニング,原核発現および機能同定を,中華トリプトファンのトリプトファン1遺伝子のクローニングによって行った。【JST・京大機械翻訳】

Cloning, prokaryotic expression and function of the Bufo bufo gargarizans tryptophan hydroxylase I gene

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巻： 51 号： 7 ページ： 1158-1164 発行年： 2016年
JST資料番号： C2527A ISSN： 0513-4870 CODEN： YHHPAL 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：原著論文発行国：中国 (CHN) 言語：中国語 (ZH)

トリプトファンヒドロキシラーゼ(TRYPTOPHAN HYDROXYLASE I,TPH1)はトリプトファンの5-ヒドロキシトリプタミンを生成する律速酵素であり、5-ヒドロキシトリプタミンはCHANSUの主要な活性成分だけではなく、同時に中枢神経系の重要な神経伝達物質である。重要な生理機能を有する。本研究では,中華トリプトファンのCDNAライブラリーを,中華耳后腺のCDNAライブラリーからクローン化した。原核生物組換え融合発現プラスミドPMAL-BBGTPH1を構築し、それをESCHERICHIA COLI TB1に導入し、IPTGで組換え菌を誘導し、誘導発現条件を最適化した。トリプトファンを基質として体外酵素反応を行い、LC-MS法を用いて反応産物を同定した。結果は,BBGTPH1遺伝子の完全長CDNAが1BPであり,オープンリーディングフレーム(ORF)が1BPであり,蛋白質の分子量が55.2KDAであり,理論的等電点が5.58であることを示した。芳香族のヒドロキシラーゼヒドロキシラーゼは,ファミリーの保存ドメインと芳香族のヒドロキシラーゼファミリーに特有の特徴的なシグナル配列を持つ。アミノ酸配列解析の結果,アミノ酸配列は他の種のTPH1蛋白質と高い相同性を持つことが示された。系統樹は,BBGTPH1がアフリカツメガエルのTPH1と最も近縁であることを示した。BBGTPH1はEである。E.COLI TB1において効率的に発現することができ,その最適発現条件は誘導温度20°C,IPTG濃度0.5MMOL・L(-1)であった。酵素活性試験の結果は,組換えBBGTPH1が高い触媒活性を持ち,トリプトファンを5-Qiang色An酸に変換できることを示した。本研究では、ヒキガエル属動物のトリプトファンヒドロキシラーゼの完全長CDNA配列を初めて獲得し、その触媒機能を検証し、ヒキガエル中のヒキガエル類化合物の生合成の分子メカニズム及び二次代謝調節の研究に科学的根拠を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

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アミノ酸 , 消化器の基礎医学 , 細胞膜の受容体

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中華1遺伝子のクローニング,原核発現および機能同定を,中華 トリプトファンのトリプトファン1遺伝子のクローニングによって行った。【JST・京大機械翻訳】

中華1遺伝子のクローニング,原核発現および機能同定を,中華トリプトファンのトリプトファン1遺伝子のクローニングによって行った。【JST・京大機械翻訳】