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J-GLOBAL ID:201702286786574464   整理番号:17A0103214

大腸菌YACG亜鉛フィンガー構造の金属結合と機能特性【JST・京大機械翻訳】

Characterization of Metal Binding and Function of Zinc-finger Motif in Escherichia coli YacG
著者 (7件):
資料名:
巻: 32  号:ページ: 1004-1011  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2257A  ISSN: 1007-7626  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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YACGは,大腸菌ギラーゼ(E. COLI GYRASE)の活性を阻害する内因性小分子蛋白質であり,65個のアミノ酸残基のみからなる。核磁気共鳴(NMR)研究によると、YACG構造には1つのCYS-X2-CYS-X15-CYS-X3-CYS配列の亜鉛フィンガードメインが含まれているが、その作用は明らかではない。本研究では,亜鉛または鉄を添加したM9ベース培地において,それぞれ亜鉛および鉄を含むYACG蛋白質を発現させ精製し,鉄およびL-システインを同時に添加したM9ベース培地において鉄を含む蛋白質を精製することができることを見出した。これは,YACGが亜鉛フィンガー蛋白質だけでなく,鉄結合や鉄結合蛋白質であることを示唆している。部位特異的突然変異実験により,YACG亜鉛フィンガー構造中の4つのシステインが残基突変後,その結合した亜鉛,鉄,鉄の含有量が著しく低下することが分かった。このことは,亜鉛結合,鉄結合および鉄結合部位が亜鉛フィンガードメインの4つのシステイン残基に位置していることを示唆している。内の過剰発現は,IPTGによって誘発された野生型YACG蛋白質の発現が阻害されることを示したが,過剰発現突然変異体蛋白質(YACG-C12S)はその成長を阻害した。IN VITRO実験により、亜鉛結合、鉄結合及び鉄結合形式のYACGタンパク質がEに対して発見された。E.COLI GYRASEはDNA螺旋活性の阻害作用には有意な差はなかったが,亜鉛フィンガー構造変異体蛋白質(YACG-C12S)はGYRASE活性に対する阻害作用が有意に減弱した。これらの結果は,完全な亜鉛フィンガー構造がYACG活性を阻害する機能に重要な役割を果たしていることを示している。本研究はGYRASE阻害剤系抗生物質の研究開発に有用な手がかりを提供する可能性がある。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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