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J-GLOBAL ID：201702286833518023   整理番号：17A0109761

ウシMEN1遺伝子の真核発現ベクターの構築とその発現解析【JST・京大機械翻訳】

Construction of Eukaryotic Expression Vector for Bos taurus MEN1 Gene and Its Expression Analysis in Different Cell Lines

著者 (9件)： Liu Xue (Shandong Key Laboratory of Animal Bioengineering and Disease Prevention, College of Animal Science and Technology, Shandong Agricultural University) ,  Li Honghui (Shandong Key Laboratory of Animal Bioengineering and Disease Prevention, College of Animal Science and Technology, Shandong Agricultural University) ,  Wang Zhonghua (Shandong Key Laboratory of Animal Bioengineering and Disease Prevention, College of Animal Science and Technology, Shandong Agricultural University) ,  Lin Xueyan (Shandong Key Laboratory of Animal Bioengineering and Disease Prevention, College of Animal Science and Technology, Shandong Agricultural University) ,  Yan Zhengui (Shandong Key Laboratory of Animal Bioengineering and Disease Prevention, College of Animal Science and Technology, Shandong Agricultural University) ,  Hou Qiuling (Shandong Key Laboratory of Animal Bioengineering and Disease Prevention, College of Animal Science and Technology, Shandong Agricultural University) ,  Wang Yun (Shandong Key Laboratory of Animal Bioengineering and Disease Prevention, College of Animal Science and Technology, Shandong Agricultural University) ,  Hu Zhiyong (Shandong Key Laboratory of Animal Bioengineering and Disease Prevention, College of Animal Science and Technology, Shandong Agricultural University) ,  Shi Kerong (Shandong Key Laboratory of Animal Bioengineering and Disease Prevention, College of Animal Science and Technology, Shandong Agricultural University)
資料名： Nongye Shengwu Jishu Xuebao  (Nongye Shengwu Jishu Xuebao)
巻： 24  号： 3  ページ： 366-372  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2715A  ISSN： 1674-7968  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 多発性内分泌腺腫の病原因子1(MULTIPLE ENDOCRINE NEOPLASIA I,MEN1)は乳腺の発育と泌乳行動の調節に参与する。本研究では、ウシ(BOS TAURUS)MEN1遺伝子(BMEN1)の全長CDNAをクローニングし、異なる細胞においてBMEN1 MRNA及びそのコード蛋白メニンの発現状況を測定した。GENBANKにおけるBMEN1遺伝子配列に従って,特異的プライマーを設計し,QRTPCR法によりECOR IおよびHINDIII III切断部位を持つBMEN1フラグメントを得て,真核生物発現ベクターPCDNA3.1-MYC-HIS(A)にクローニングした。IN VITROにおいて、同種異系の上皮細胞(BOVINE MAMMARY GLAND EPITHELIAL CELL, MAC-T)と性(中国 BARABENSIS)の卵巣細胞(CHINESE HAMSTER OVARY CELLS,CHO)、マウス(MUS MUSCULUS)の筋芽細胞(MOUSE 細胞 CELLS,C2C12)をトランスフェクションした。QRT1MRNAと蛋白質メニンの発現は,QRT-PCRとウエスタンブロットによって検出した。消化1遺伝子の真核生物発現ベクターPCDNA3.1-MYC-HIS-BMEN1を,制限酵素消化および遺伝子配列決定によって首尾よく構築した。確立したトランスフェクションシステムは、目的遺伝子遺伝子1を3種類の異なる細胞において、MRNAと目的タンパク質の発現に成功し、トランスフェクション後24時間でいずれも最高発現量に達し、極めて顕著なレベル(P<0.01)に達し、その後次第に低下した。その中、CHO細胞中のトランスフェクション24H後のBMEN1 MRNAとメニンタンパクの発現量はそれぞれ対照の28倍と5.65倍であった。本研究では、BMEN1遺伝子の真核発現ベクター及びそのトランスフェクションシステムを構築し、異なる細胞において発現することができ、IN VITROでのMEN1遺伝子の乳腺に対する調節機能及び生体代謝に対する調節メカニズムについて、ツールと技術体系を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 上皮細胞 ,  乳腺 ,  トランスフェクション ,  ウェスタンブロット法 ,  *遺伝子 ,  消化 ,  真核生物 ,  CHO細胞 ,  DNA制限酵素
準シソーラス用語： 遺伝子配列 ,  メニン ,  クローニング ,  *遺伝子発現プロファイリング ,  *発現ベクター ,  *MEN1遺伝子 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： Bovine multiple endocrine neoplasia I gene (MEN1) ,  Eukaryotic expression ,  Bovine mammary gland epithelial cell (MAC-T) ,  Chinese hamster ovary cell (CHO) ,  Mouse myoblast cell (C2C12)

分類 (4件)： 細胞生理一般  (EF02010S) ,  遺伝子操作  (EC02050B) ,  内分泌系の腫よう  (GL04000P) ,  医用素材  (GA05040H)

タイトルに関連する用語 (5件)： ウシ ,  MEN1遺伝子 ,  発現ベクター ,  構築 ,  発現解析