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J-GLOBAL ID:201702287262531615   整理番号:17A0658879

階層的反復変異誘発によるロバストマラチオン分解菌に対するホスホトリエステラーゼの組合せ進化【Powered by NICT】

Combinatorial evolution of phosphotriesterase toward a robust malathion degrader by hierarchical iteration mutagenesis
著者 (8件):
資料名:
巻: 113  号: 11  ページ: 2350-2357  発行年: 2016年 
JST資料番号: D0019A  ISSN: 0006-3592  CODEN: BIBIAU  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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マラチオンは米国で最も広く用いられている有機リン系農薬と発展途上国の一つである。ここで熱安定性をも考慮しながら,ホスホトリエステラーゼPoOPH_M2から出発してマラチオンの分解速度を増加させた。第一段階では,結合ポケット(CASTing)ライニング残基で反復飽和変異誘発は基質結合と活性のための酵素活性部位を最適化した。増強活性のためのホットスポットは,epPCRベースランダム変異誘発を通して発見され,これらの有益な変異をDNAシャッフリングにより組み換えた。最後に,in silicoエネルギー計算(FoldX)により誘導され,変異体の熱安定性は改善された。突然変異はコア領域から拡張進化経路中の酵素の表面に集める。スクリーニング<9,000変異体後,最良の変異体PoOPH_M9は野生型PoOPH_M2より25倍高い活性を示し,67.6°Cの熱安定性(T_50~15)PoOPH_M9はマラチオン解毒のための効率的でロバストな候補であると思われる。Copyright 2017 Wiley Publishing Japan K.K. All Rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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分類 (4件):
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酵素一般  ,  分子遺伝学一般  ,  酵素生理  ,  酵素の応用関連 
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