ウシGHR遺伝子とMIR-139標的関係の検証【JST・京大機械翻訳】

Jin Lianfeng; Yu Guangpu; Sun Xia; Li Qingzhang; Gao Xuejun; Cui Yingjun

文献

J-GLOBAL ID：201702288618905135 整理番号：17A0354156

ウシGHR遺伝子とMIR-139標的関係の検証【JST・京大機械翻訳】

Targeting Verification between Bta-GHRand miR-139

出版者サイト複写サービスで全文入手
高度な検索・分析はJDreamⅢで

著者 (6件)： , , , , ,
資料名：
巻： 47 号： 12 ページ： 2398-2404 発行年： 2016年
JST資料番号： C2231A ISSN： 0366-6964 CODEN： CMHPAI 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：原著論文発行国：中国 (CHN) 言語：中国語 (ZH)

本研究の目的は,ウシ成長ホルモン受容体(GHR)遺伝子の3’非翻訳領域(UTR)の二重ルシフェラーゼ受容体を構築することである。そして,MIR-139とウシGHR遺伝子の間の標的関係を決定した。本研究では,MIR-139とウシGHR遺伝子の3’UTRの結合部位をバイオインフォマティクスにより予測した。ウシGHR遺伝子の3’UTRと突然変異体を合成し,二重-PSI-2にクローニングした。野生型(PSICHECK2-GHR-W3’UTR)および変異型(PSICHECK2-GHR-M3’UTR)ルシフェラーゼレポータープラスミドを構築した。培養したHELA細胞を4つのグループに分け、それぞれMIR-139MIMICあるいは陰性対照とPSICHECK2-GHR-W 3’UTR組換えプラスミドあるいはPSICHECK2-GHR-M 3’UTR組換えプラスミドを共トランスフェクションした。次に,ルシフェラーゼ活性を二重ルシフェラーゼ法によって検出した。その後、乳牛乳腺上皮細胞を培養し、それぞれ対照群、陰性対照群、MIR-139MIMIC群及びMIR-139INHIBITOR群とした。陰性対照群、MIR-139MIMIC群及びMIR-139INHIBITOR群に対して、それぞれ染陰性対照、MIR-139MIMIC又はMIR-139INHIBITORをトランスフェクションした。各群のMIR-139とGHR遺伝子のMRNA発現をQPCR(リアルタイム QUANTITATIVE PCR)によってさらに検出した。その結果,野生型および変異型二重ルシフェラーゼレポータープラスミドPSICHECK2-GHR-W3’UTRおよびPSICHECK2-GHR-M3’UTRを構築した。野生型組換えプラスミドPSICHECK2-GHR-W 3’UTRとMIR-139MIMICをHELA細胞に同時形質移入した後、ルシフェラーゼレポータープラスミド発現のルシフェラーゼ活性はその他の処理組より有意に低かった(P<0.05)。QPCRの結果は,MIR-139が,乳腺上皮細胞におけるGHR遺伝子MRNA発現を有意に下方制御することを示した(P<0.05)。本研究では,ウシの野生型と突然変異GHR遺伝子の3’UTRのルシフェラーゼレポータープラスミドを構築した。二重とQPCRは,MIR-139とウシGHR遺伝子の3’UTRの間に標的関係があることを示した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

, , , , , , , ,
, , , , , , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： , , ,

微生物の生化学 , 分子遺伝学一般 , 酵素一般

, ,

前のページに戻る