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J-GLOBAL ID:201702290462403728   整理番号:17A0268139

極端な MANZAENSIS膜蛋白質抽出法の確立と応用【JST・京大機械翻訳】

Establishment of Extraction Methods of Membrane Proteins from Extremely Thermoacidophilic Acidianus manzaensis and Its Preliminary Application
著者 (5件):
資料名:
巻: 32  号: 11  ページ: 130-136  発行年: 2016年 
JST資料番号: C2986A  ISSN: 1002-5464  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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万(MANZAENSIS MANZAENSIS)を研究対象として、その膜タンパク質の抽出方法を探索し、最適化した後、この菌はそれぞれ単体硫黄(S~0)と第一鉄(FE~(2+))をエネルギー基質として成長させた時の膜タンパク質を抽出した。2つのエネルギー基質における膜蛋白質の発現を,ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)によって研究した。まず、80°C水浴で60-70MINでAを調製した。細胞外接着蛋白質を分離した。第二に,TRITON X-110,SDSおよびTRITON X-114の抽出効果を比較し,TRITON X-114の抽出効率が10%(W/V)であることを示した。異なる沈殿剤(トリクロロ酢酸(TCA)、アセトン、トリクロロ酢酸/アセトン、メタノールとエタノール)の膜タンパク質沈殿に対する効果を比較した結果、TCAの沈殿効果が最も理想的ではなく、沈殿物の分子量のタンパク質の欠損が起こり、その他の数種には明らかな差がないことが分かった。膜蛋白質抽出のための沈殿剤として,アセトンを用いた。最終的に,最適化された膜蛋白質抽出法に基づき,S0とFE(2+)をそれぞれ培養した。SDS-PAGEの結果,MANZAENSIS蛋白質の分子量は35.6KDであり,SDS-PAGEの結果は16.9KDであることを示した。MANZAENSISはS0の成長時に出現し、これらのタンパク質はAの可能性があることを示した。MANZAENSISは硫黄酸化において重要な役割を果たす。分子量が72KDと26KDの蛋白質がAであった。MANZAENSISはFE(2+)で成長させた時、S0で成長させた場合より著しくアップレギュレーションされ、このタンパクがAとなる可能性があることが示された。MANZAENSISは鉄酸化に関与していた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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, 【Automatic Indexing@JST】
分類 (1件):
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蛋白質・ペプチド一般 
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