特許
J-GLOBAL ID:201103096972386023

粘着末端を有するDNA断片の調製方法

発明者:
出願人/特許権者:
代理人 (5件): 小林 浩 ,  片山 英二 ,  大森 規雄 ,  岩田 耕一 ,  鈴木 康仁
公報種別:再公表公報
出願番号(国際出願番号):JP2009054989
公開番号(公開出願番号):WO2009-113709
出願日: 2009年03月10日
公開日(公表日): 2009年09月17日
要約:
本発明は、粘着末端を有する所望の2本鎖DNA断片を、PCR後の増幅産物(増幅断片)から制限酵素処理を介さずに直接的かつ容易に得る、DNA断片の調製方法等を提供する。本発明の粘着末端を有するDNA断片の調製方法は、(i)鋳型DNAと、特定のプライマーとを用いてPCR反応を行うことにより増幅DNA断片を得る工程、及び(ii)前記増幅DNA断片に所定の処理を施すことにより当該断片中の保護基を脱離させる工程を含む方法である。ここで、前記特定のプライマーは、鋳型DNA中の増幅対象領域と相補的に結合する塩基配列からなる相補DNA部分と、当該相補DNA部分の5’末端に連結し且つ前記増幅対象配列と相補的に結合しない塩基配列からなる非相補DNA部分とから構成され、当該非相補DNA部分の塩基配列中の少なくとも3’末端に相当する塩基がDNAポリメラーゼによるDNA複製の進行を停止させ得る保護基で修飾されたものである。
請求項(抜粋):
PCR用のプライマーであって、 鋳型DNA中の増幅対象領域と相補的に結合する塩基配列からなる相補DNA部分と、当該相補DNA部分の5’末端に連結し且つ前記増幅対象配列と相補的に結合しない塩基配列からなる非相補DNA部分とから構成され、 当該非相補DNA部分の塩基配列中の少なくとも3’末端に相当する塩基がDNAポリメラーゼによるDNA複製の進行を停止させ得る保護基で修飾されている ことを特徴とする、前記プライマー。
IPC (2件):
C12N 15/09 ,  C12Q 1/68
FI (2件):
C12N15/00 A ,  C12Q1/68 A
Fターム (10件):
4B024AA20 ,  4B024CA01 ,  4B024HA08 ,  4B063QA01 ,  4B063QR08 ,  4B063QR62 ,  4B063QS16 ,  4B063QS25 ,  4B063QS36 ,  4B063QX02

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