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J-GLOBAL ID：200902203355097447   整理番号：09A1074951

ヒトIgE Cε-4蛋白質を分泌する安定細胞株の樹立と同定

Establishment and identification of stable cell line secreting humen IgE Cε-4 protein

著者 (7件)： QIAO Chunxia (Dep. of Molecular Immunology, Inst. of Basic Medical Sciences, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing) ,  GUO Leiming (Dep. of Molecular Immunology, Inst. of Basic Medical Sciences, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing) ,  L(U) Ming (Dep. of Molecular Immunology, Inst. of Basic Medical Sciences, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing) ,  YU Ming (Dep. of Molecular Immunology, Inst. of Basic Medical Sciences, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing) ,  LI Yan (Dep. of Molecular Immunology, Inst. of Basic Medical Sciences, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing) ,  FENG Jiannan (Dep. of Molecular Immunology, Inst. of Basic Medical Sciences, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing) ,  SHEN Beifen (Dep. of Molecular Immunology, Inst. of Basic Medical Sciences, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing)
資料名： Zhonghua Weishengwuxue he Mianyixue Zazhi  (Zhonghua Weishengwuxue he Mianyixue Zazhi)
巻： 28  号： 7  ページ： 661-665  発行年： 2008年 
JST資料番号： C2322A  ISSN： 0254-5101  CODEN： ZWMZDP  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:ヒトIgE Cε-4蛋白質を分泌する安定細胞株を樹立し,FcεRIの結合能を調べた。方法:E24遺伝子はSKO-O07細胞株から得て,pcDNA3.1(+)(シグナルペプチドを合成しE24遺伝子の5’末端に融合した)またはpCMV-Lベクターにクローン化した。293T細胞への一時的トランスフェクション後,分泌F24蛋白質をサンドイッチELISAで分析した。最良のベクターを選択し,LipofectAMI-NETM2000試薬と共にCHO細胞にトランスフェクトした。G418により選択され限界希釈法で3回サブクローン化した後,2つの安定細胞株を樹立した。E24遺伝子はRT-PCRにより増幅し,上清中のE24蛋白質はELISAにより同定した。さらに,FcεR IIIの結合能をフローサイトメトリーにより分析した。結果:3つの哺乳類発現ベクターSP-E24-F3.1,SPlI-E24-P3.1およびE24-PLを構築し,一時的に293T細胞にトランスフェクトした。上清へのE24蛋白質流出は,それぞれ19.1,19.4,8.7μg/mlだった。その後,ベクターSP IX-E24-P3.1をCHO細胞へトランスフェクトした。最後に,E24蛋白質分泌2単一クローンを安定的に得た。E24流出はすべて少なくとも25μg/mlだった。RT-PCRにより2つのクローンのうち1つからE24遺伝子を検出した。さらに,フローサイトメトリーの結果は,E24が受容体に用量依存性に結合することを示した。結論:E24蛋白質を分泌する2つの安定細胞株を得ることができ,E24はFcεRIに特異的に結合した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST

シソーラス用語： ヒト ,  培養細胞 ,  *免疫グロブリンE ,  *Fcε受容体 ,  トランスフェクション ,  ELISA ,  CHO細胞 ,  RT-PCR法
準シソーラス用語： 293T細胞 ,  *FcεRI ,  サンドイッチELISA ,  樹立細胞株

分類 (1件)： 抗原・抗体・補体の生化学  (ED04020L)

タイトルに関連する用語 (6件)： ヒト ,  IgE ,  蛋白質 ,  分泌 ,  細胞株 ,  同定