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J-GLOBAL ID：200902204144103730   整理番号：09A0006884

ジオールデヒドラターゼ触媒作用での補酵素B₁₂結合部位のアデニン固定とイオン対の役割

Roles of adenine anchoring and ion pairing at the coenzyme B₁₂-binding site in diol dehydratase catalysis

著者 (5件)： OGURA Ken-ichi (Okayama Univ., JPN) ,  KUNITA Shin-ichi (Okayama Univ., JPN) ,  MORI Koichi (Okayama Univ., JPN) ,  TOBIMATSU Takamasa (Okayama Univ., JPN) ,  TORAYA Tetsuo (Okayama Univ., JPN)
資料名： FEBS Journal  (FEBS Journal)
巻： 275  号： 24  ページ： 6204-6216  発行年： 2008年12月 
JST資料番号： B0206B  ISSN： 1742-464X  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： Serα224とLysβ135変異体を作出し,ジオールデヒドラターゼ触媒作用でのアデノシルコバラミン(AdoCbl)結合部位のアデニン固定とイオン対の役割を調査した。Sα224Aはアデニン部分のN3と水素結合を形成できず,野生型の19%の活性を示した。Sα224Nは5%の活性しかなく,基質の非存在下でO₂に非感受性であった。したがって,Serα224がCob-C結合活性化と酵素不活性化防止に重要なことを示唆した。Sα224A触媒作用時にコバラミン(II)とラジカル種が形成され,酵素不活性化に伴いアデノシルグループから5′-デオキシアデノシンが形成されたが,アポ酵素自体は障害を受けず,この不活性化は機構に基づくことを示唆した。Kβ135のArg,AlaやGlnによる置換は比較的高い活性を示した。Kβ135RはAdoCblやシアノコバラミン(CN-Cbl)への結合親和性を増加したが,Kβ135Eは親和性を100倍以上低下したことから,β135への負電荷導入はコバラミンへの親和性の破壊・酵素活性低下をもたらすことを見出した。

シソーラス用語： ヒドロリアーゼ ,  *補酵素B12 ,  結合部位 ,  イオン対 ,  部位特異的変異誘発 ,  アミノ酸残基 ,  突然変異体 ,  酵素反応速度論 ,  ESR【磁気共鳴】 ,  ホロ酵素 ,  アポ酵素 ,  *アデノシルコバラミン ,  ジオールデヒドラターゼ ,  *大環状化合物 ,  *架橋化合物

分類 (1件)： 酵素一般  (EB09010D)

タイトルに関連する用語 (7件)： ジオールデヒドラターゼ ,  触媒作用 ,  補酵素B12 ,  結合部位 ,  アデニン ,  イオン対 ,  役割