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J-GLOBAL ID：200902208523484836   整理番号：08A0844928

自己分解完全抑制により最適化したグルタミルエンドペプチダーゼの大腸菌発現系

An Escherichia coli expression system for glutamyl endopeptidases optimized by complete suppression of autodegradation

著者 (5件)： ONO Toshio (Dep. of Oral Molecular Biology, Course of Medical and Dental Sciences, Nagasaki Univ. Graduate School of Biomedical ...) ,  NEMOTO Takayuki K. (Dep. of Oral Molecular Biology, Course of Medical and Dental Sciences, Nagasaki Univ. Graduate School of Biomedical ...) ,  SHIMOYAMA Yu (Dep. of Oral Microbiology, Iwate Medical Univ. School of Dentistry, Morioka 020-8505, JPN) ,  KIMURA Shigenobu (Dep. of Oral Microbiology, Iwate Medical Univ. School of Dentistry, Morioka 020-8505, JPN) ,  OHARA-NEMOTO Yuko (Dep. of Oral Molecular Biology, Course of Medical and Dental Sciences, Nagasaki Univ. Graduate School of Biomedical ...)
資料名： Analytical Biochemistry  (Analytical Biochemistry)
巻： 381  号： 1  ページ： 74-80  発行年： 2008年10月01日 
JST資料番号： H0177B  ISSN： 0003-2697  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 黄色ブドウ球菌のV8菌株から分離したグルタミルエンドペプチダーゼI族の一員である,V8プロテアーゼ(GluV8)は,特有の基質特異性と界面活性剤耐性を持つため,プロテオーム分析に広く用いられている。自己蛋白質分解を抑制する技術(キメラ形としてのStaphylococcus epidermidisホモログ(GluSE)プロ配列の利用,またはGluV8プロ配列の4置換導入)に基づいて,GluV8を生産する大腸菌発現系を最近開発した。自己分解完全抑制のために,GluV8プロ配列内5アミノ酸置換を介して,本技術を改良した。その結果,GluV8プロ形の回収は20fg/細胞で,構成的不活性型GluV8量に匹敵し,自己蛋白質分解の完全抑制を暗示した。また,この変異プロペプチドは,Staphylococcus warneriのグルタミルエンドペプチダーゼ成熟配列発現にも効果的であった。in vitroサーモリシンが仲介する通常の開裂機構を介して,組換蛋白質を活性型に転換することができた。本法は,今まで大腸菌でほとんど生産されなかった,プロテアーゼ発現の手段を明らかにする可能性がある。Copyright 2008 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *ペプチド結合ヒドロラーゼ ,  *組換タンパク質 ,  *遺伝子発現 ,  大腸菌 ,  自己分解 ,  ブドウ球菌属 ,  アミノ酸配列 ,  塩基対置換 ,  酵素前駆体 ,  Staphylococcus warneri ,  アミノ酸置換 ,  表皮ブドウ球菌 ,  *分子遺伝現象 ,  微生物 ,  ミクロコッカス科
準シソーラス用語： Staphylococcus epidermidis ,  *グルタミルエンドペプチダーゼ

分類 (2件)： 遺伝子発現  (EC02040Q) ,  微生物,組織・細胞培養による物質生産一般  (FK03010P)

タイトルに関連する用語 (4件)： 自己分解 ,  最適化 ,  大腸菌 ,  発現