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J-GLOBAL ID：200902210589220281   整理番号：09A0082903

オオムギの緑葉で誘導されるシステインプロテアーゼの特性化とクローニング

Characterization and cloning of cysteine protease that is induced in green leaves of barley

著者 (5件)： WATANABE Yasushi (Dep. of Biological Sci., Fac. of Sci., Shizuoka Univ., Shizuoka Univ., Shizuoka 422-8529, JPN) ,  MATSUSHIMA Shuhei (Dep. of Biological Sci., Fac. of Sci., Shizuoka Univ., Shizuoka Univ., Shizuoka 422-8529, JPN) ,  YAMAGUCHI Akemi (Dep. of Biological Sci., Fac. of Sci., Shizuoka Univ., Shizuoka Univ., Shizuoka 422-8529, JPN) ,  SHIOI Yuzo (Dep. of Biological Sci., Fac. of Sci., Shizuoka Univ., Shizuoka Univ., Shizuoka 422-8529, JPN) ,  SHIOI Yuzo (Dep. of Bioscience, Graduate School of Sci. and Technol., Shizuoka Univ., Shizuoka 422-8529, JPN)
資料名： Plant Science  (Plant Science)
巻： 176  号： 2  ページ： 264-271  発行年： 2009年02月 
JST資料番号： C0945B  ISSN： 0168-9452  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アイルランド (IRL)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ドデシル硫酸ナトリウム(SD)依存性システインプロテアーゼを,合成基質N-スクシニル-Leu-Leu-Val-Tyr-4-メチルクマロイル-7-アミド(Suc-LLVY-MCA)からの7-アミノ-4-メチル-クマリン(AMC)遊離を測定することにより,オオムギ(Hordeum vulgare L.)の緑葉で研究した。HvCP(w/v SDSにより活性化されるHordeum vulgareシステインプロテアーゼ)と命名した酵素は葉の成長と共によく増加したが,老化時に著しく減少した。HvCP3を146倍に7.74%の収率で粗抽出物より4段階のクロマトグラフィーで精製した。この酵素はpH7-8で広い最大pHを示し,酵素活性は0.1%(w/v)SDSにより約10倍活性化された。天然酵素の分子量は約50kと推定された。プロテアーゼのSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動は蛋白質は33kと18kのサブユニットから構成されている複合体であることを示唆した。酵素活性は10μM trans-エポキシスクシニル-L-ロイシルアミド-(4-グアニジド)ブタン(E-64)及び100μMロイペプチンなどシステインプロテアーゼ阻害剤で特異的にそれぞれ5%及び4%に阻害された。HvCP3の完全長cDNAをクローニング,その配列はパパインファミリー(C1A)の他の植物システインプロテアーゼと高い相同性を示した。このプロテアーゼのサイトゾルにおける維持者としての機能的役割も考察した。Copyright 2009 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *オオムギ ,  葉 ,  *システインプロテイナーゼ ,  *遺伝子クローニング ,  老化 ,  クロマトグラフィー ,  分子量 ,  サブユニット ,  酵素活性化 ,  酵素阻害剤 ,  ゲル電気泳動 ,  相同性 ,  アミノ酸配列 ,  脂肪族アルコール ,  無機酸エステル ,  システインプロテイナーゼ阻害剤
準シソーラス用語： Hordeum vulgare ,  システインプロテアーゼ阻害剤

分類 (1件)： 植物の生化学  (EH01050J)

物質索引 (1件)： ドデシル硫酸ナトリウム

タイトルに関連する用語 (7件)： オオムギ ,  緑 ,  葉 ,  誘導 ,  システインプロテアーゼ ,  特性化 ,  クローニング