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J-GLOBAL ID:200902257547185890   整理番号:09A0506817

モロニーマウス白血病ウイルス逆転写酵素の新しい突然変異により,テンプレート-プライマーへのより強固な結合を介して熱安定性が増加する

Novel mutations in Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase increase thermostability through tighter binding to template-primer
著者 (2件):
資料名:
巻: 37  号:ページ: 473-481  発行年: 2009年 
JST資料番号: D0242C  ISSN: 0305-1048  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: イギリス (GBR)  言語: 英語 (EN)
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モロニーマウス白血病ウイルス逆転写酵素(MMLV RT)の熱安定性を増加させる目的で,熱不活性化に対する抵抗性が増加した突然変異体についてスクリーニングを行なった。MMLV RTの55°Cでの半減期をテンプレート-プライマーの存在下で5分未満から30分まで増加させる5つの突然変異E69K,E302R,W313F,L435GおよびN454Kが認められた。これらの変異により,広範囲のcDNA合成温度にわたって五重変異体(M5)の比活性が増加して温度プロファイルが変化した。M5ではcDNAが高収率で得られ,二次構造を含むRNAの増幅に高温で用いた時に野生型にRTよりも良好なRT-PCR性能が認められた。M5はテンプレート-プライマーに強く結合し,熱不活性化に対して防御的に働くと推定された。
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分類 (2件):
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ウイルスの生化学  ,  酵素一般 

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