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J-GLOBAL ID：200902264248505230   整理番号：08A0888426

ヒラメ(Paralichthys olivaceus)由来のカテプシンXの分子クローニング,組織内分布及び酵素的特性化

Molecular cloning, tissue distribution and enzymatic characterization of cathepsin X from olive flounder (Paralichthys olivaceus)

著者 (10件)： AHN Sang Jung (Dep. of Biotechnology, Pukyong National Univ., Busan 608-737, KOR) ,  KIM Na Young (Dep. of Aquatic Life Medicine, Pukyong National Univ., Busan 608-737, KOR) ,  JEON Soo Jin (School of Marine and Atmospheric Sciences, Stony Brook Univ., Stony Brook, NY 11794-5000, USA) ,  SUNG Ji Hea (Dep. of Biotechnology, Pukyong National Univ., Busan 608-737, KOR) ,  JE Ju Eun (Dep. of Aquatic Life Medicine, Pukyong National Univ., Busan 608-737, KOR) ,  SEO Jung Soo (Pathology Team, National Fisheries Res. & Dev. Inst., Busan 619-902, KOR) ,  KIM Moo-sang (Dep. of Aquatic Life Medicine, Pukyong National Univ., Busan 608-737, KOR) ,  KIM Joong Kyun (Dep. of Biotechnology, Pukyong National Univ., Busan 608-737, KOR) ,  CHUNG Joon Ki (Dep. of Aquatic Life Medicine, Pukyong National Univ., Busan 608-737, KOR) ,  LEE Hyung Ho (Dep. of Biotechnology, Pukyong National Univ., Busan 608-737, KOR)
資料名： Comparative Biochemistry and Physiology. B. Biochemistry and Molecular Biology  (Comparative Biochemistry and Physiology. B. Biochemistry and Molecular Biology)
巻： 151  号： 2  ページ： 203-212  発行年： 2008年10月 
JST資料番号： A0956B  ISSN： 1096-4959  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 本研究では,ヒラメ(Paralichthys olivaceus)由来のカテプシンX(PoCtX)をコードするcDNAをクローン化した。特異なカテプシンXファミリーPoCtXに保存されているHIPモチーフの存在によりカテプシンLまたはBサブファミリと異なるカテプシンX群との関係を明らかに示した。RT-PCR及びリアルタイムPCR分析の結果から,正常組織及びLPS刺激組織における遍在するPoCtX発現を明らかにした。PoCtxの酵素前駆体(プロPoCtX)をコードするcDNAをグルタチオンS-トランスフェラーゼを有する57kDa融合蛋白質として大腸菌で発現させた。その活性は合成蛍光発生ペプチド基質Z-Phe-Arg-AMCの切断により定量し,プロテアーゼ活性に対する至適pHは5であった。組換プロPoCtXはアンチパイン及びロイペプチンにより阻害された。ピラメ筋肉抽出物からのPoCtX蛋白質をDEAE-Sephagel HPLCカラムを用いて一段階精製過程により9.49倍に精製した。天然PoCtX及び組換プロPoCtX蛋白質に対する抗プロPoCtXポリクローナル抗体の反応能力及び検出特異性を評価するため,ウェスタンブロット法及びELISA法を行った。本知見により,ヒラメカテプシンXはアミノ酸配列,組織内発現及び生化学的活性に関してカテプシンXサブファミリー内で高保存されていることを示した。Copyright 2008 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *カテプシン ,  *ヒラメ ,  遺伝子クローニング ,  遺伝子発現 ,  アミノ酸配列 ,  系統樹 ,  RT-PCR法 ,  PCR法 ,  グルタチオントランスフェラーゼ ,  融合タンパク質 ,  ペプチド ,  組換タンパク質 ,  酵素阻害 ,  筋肉 ,  ポリクローナル抗体 ,  ELISA ,  オリゴペプチド ,  脂肪族アルデヒド ,  脂肪族カルボン酸 ,  カルボアミド ,  トリペプチド ,  リアルタイムPCR法
準シソーラス用語： カテプシンX

分類 (2件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  遺伝子の構造と化学  (EC02020U)

物質索引 (2件)： アンチパイン ,  ロイペプチン

タイトルに関連する用語 (6件)： ヒラメ ,  カテプシン ,  分子クローニング ,  組織内分布 ,  酵素 ,  特性化