文献

J-GLOBAL ID：200902283877481330   整理番号：08A0659226

K55Rの突然変異誘起によるPenicillium expansumリパーゼランダム突然変異体Ep8の熱安定性の改善

Improvement of the Thermostability of Penicillium expansum Lipase by Mutagenesis the Random Mutant Ep8 at K55R

著者 (4件)： CAI ShaoLi (Coll. of Life Sciences, Fujian Normal Univ., Fuzhou) ,  LIN JunHan (Coll. of Life Sciences, Fujian Normal Univ., Fuzhou) ,  WANG CaiMei (Coll. of Life Sciences, Fujian Normal Univ., Fuzhou) ,  LIN Lin (Coll. of Life Sciences, Fujian Normal Univ., Fuzhou)
資料名： Shengwu Gongcheng Xuebao  (Shengwu Gongcheng Xuebao)
巻： 23  号： 4  ページ： 677-680  発行年： 2007年 
JST資料番号： C2184A  ISSN： 1000-3061  CODEN： SGXUED  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： Penicillium expansumリパーゼ(PEL)の熱安定性を向上するために,リパーゼコード遺伝子は部位特異的変異誘発によって変異させられた。組換え型のベクトルに,二重変異体の遺伝子を含むpAO815-ep8-K55Rが,テンプレートとしてランダム変異体リパーゼep8(単一部位変異種)のcDNAを使用して,オーバラップ拡大PCR法によって組み立てられた。そして,2つの特別なプライマーが,別の変異部位K55Rを発生させるのに使用された。組換え型のベクトルは電気穿孔法によってPichia pastoris GS115に変えられた。そして,組換え型の変異種GS-pAO815-ep8-K55Rはそれがメタノールによって引き起こされた時,媒体の中へ二重突然変異リパーゼペルep8-K55R GSを隠すことができる。二重突然変異リパーゼの収量は508u/mLである。それは,野生変異型リパーゼPELep8GS(924u/mL)の収量の81%でランダム突然変異リパーゼPEL-GS(627u/mL)の55%である。二重突然変異リパーゼの特定活性は2309.1u/mgである。(それはランダム変異体リパーゼPELep8GSと野生型リパーゼPEL-GSに類似している)。二重突然変異リパーゼの至適温度は野生型リパーゼPEL-GSとランダム変異体リパーゼPELep8GSと同じである。二重突然変異リパーゼのT_mは野生型リパーゼより2.3°C高く41.0°Cであり,ランダム変異体リパーゼペルep8GSより0.8%高い。それは二重突然変異リパーゼペルep8-K55R GSには,より高い熱安定性があることを示す。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST

シソーラス用語： *Penicillium ,  *変異誘発 ,  *突然変異体 ,  *リパーゼ ,  *熱安定性 ,  *改良 ,  部位特異的変異誘発 ,  鋳型【遺伝】 ,  プライマー【遺伝】 ,  エレクトロポレーション ,  PCR法 ,  cDNA ,  ベクトル ,  突然変異 ,  脂肪族アルコール
準シソーラス用語： *突然変異誘起 ,  *改善 ,  テンプレート【遺伝】 ,  電気穿孔法

分類 (2件)： 遺伝子発現  (EC02040Q) ,  酵素一般  (EB09010D)

物質索引 (1件)： メタノール

タイトルに関連する用語 (5件)： 突然変異誘起 ,  Penicillium ,  リパーゼ ,  突然変異体 ,  熱安定性