文献

J-GLOBAL ID：200902287660781527   整理番号：07A0060056

Escherichia coliとPichia pastoris内での熱安定α-アミラーゼの発現

Expression of a thermostable a-amylase mutant Into Escherichia coli and Pichia pastoris

著者 (5件)： Du Bingbing (Inst. of Microbiology, Chinese Acad. of Sciences, Beijing) ,  Hao Shuai (Inst. of Microbiology, Chinese Acad. of Sciences, Beijing) ,  Li Yunmin (VA Medical Centre 111C5, Dep. of Medicine Univ. of California at San Francico 4150 Clement Street, USA) ,  Yue Lili (VA Medical Centre 111C5, Dep. of Medicine Univ. of California at San Francico 4150 Clement Street, USA) ,  Jiao Qinghua (Inst. of Microbiology, Chinese Acad. of Sciences, Beijing)
資料名： Weishengwu Xuebao  (Weishengwu Xuebao)
巻： 46  号： 5  ページ： 827-830  発行年： 2006年 
JST資料番号： C2382A  ISSN： 0001-6209  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： α-アミラーゼは重要な商業価値がある。それは多種類の微生物により産生される。澱粉の工業的加水分解に広く使用されている,Bacillus licheniformis由来のα-アミラーゼ遺伝子(amyE)を突然変異(amyEM)させ,PCRにより増幅しpBV220とpPIC9k内に挿入し組換ベクターpBV220-amyEMとpPIC9k-amyEMを得た。これら組換ベクターで各々相当するコンピテント細胞であるE.coli DH5aとP.pastoris GS115を形質転換した。その後結果として生じる組換株,DH5a/pBV220-amyEMとGS115/pPIC9k-amyEMを酵素活性測定とSDS-PAGEによりスクリーニングした。DH5a/pBV220-amyEMは温度誘導し,GS115/pPIC9k-amyEMはメタノール誘導した。親細胞と対比して,α-アミラーゼが両組換株において発現された。E.coli内では分子量は約55kDaだった;組換α-アミラーゼの至適温度とpHは各々80°C~90°Cと6.0だった。組換アミラーゼは野生型と比較してpH5.0~5.0に高活性を有した。Pichia pastorisでは組換アミラーゼは培地に分泌された;分子量は推定上の翻訳後修飾のため60kDaだった;至適pHは5.5にシフトした。E.coliとP.pastorisにより産生されるα-アミラーゼの比活性は各々8.1U/mgと102U/mgだった。この結果はα-アミラーゼは組換P.pastorisにおいて高効率で培地に分泌されることを示す。高温と低pHにおける高活性は組換アミラーゼに潜在的な工業応用の可能性を付与する。

シソーラス用語： 大腸菌 ,  *α-アミラーゼ ,  Pichia ,  突然変異 ,  遺伝子発現 ,  Bacillus licheniformis ,  酵素活性度 ,  pH依存性 ,  温度依存性 ,  組換タンパク質 ,  細胞分泌
準シソーラス用語： Escherichia coli ,  Pichia pastoris

分類 (1件)： 微生物酵素の生産  (FK03030L)

タイトルに関連する用語 (4件)： Escherichia ,  Pichia ,  α-アミラーゼ ,  発現