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J-GLOBAL ID：200902287973470107   整理番号：08A0743116

収束的U6とH1プロモーターによるRNAi発現ベクターに基づくランダムRNAiライブラリの構築に関する予備調査

preliminary study on construction of a random RNAi library based on RNAi expression vector with convergent U6 and H1 promoters

著者 (7件)： LI Jing (Inst. of Radiation Medicine, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing) ,  FU HanJiang (Inst. of Radiation Medicine, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing) ,  ZHU Jie (Inst. of Radiation Medicine, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing) ,  XING RuiYun (Inst. of Basic Medical Sciences, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing) ,  LING ShiGan (Inst. of Radiation Medicine, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing) ,  SUN ZhiXian (Inst. of Radiation Medicine, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing) ,  ZHENG XiaoFei (Inst. of Radiation Medicine, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing)
資料名： Junshi Yixue Kexueyuan Yuankan  (Junshi Yixue Kexueyuan Yuankan)
巻： 31  号： 3  ページ： 204-207,249  発行年： 2007年 
JST資料番号： C2452A  ISSN： 1000-5501  CODEN： JYKYEL  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】収束的U6とH1プロモーターによるRNAi発現ベクターを用いてランダムRNAiライブラリを構築した。【方法】まず第一に,EGFP遺伝子とp53遺伝子を標的とするRNAiプラスミドはベクター効率を測定するためにpRHUベクターに基づいてそれぞれを構築し,細胞レベルにおける干渉性効果を評価した。第二に,ランダム配列とPCR増幅に適した2つのリンカーを含むDNA鋳型を設計し合成した。PCR増幅とHindIII/BamHI消化の後に,DNAフラグメントはpRHUベクターにクローン化し高効率的コンピテント細胞に形質転換した。20個のクローンを無作為に選択し配列解析した。【結果】pRHUベクターを測定しベクターが外因性EGFP遺伝子と内因性p53遺伝子の発現を干渉する事実に基づいた効率的なRNAi発現ベクターであることがわかった。初期のpRHUベクター50μgから誘導して4×106の容量となったランダムRNAiライブラリは比較的短周期で構築した。DNA配列化の結果,全部で20の無作為選択したクローンはGN_(17-19)配列を含み,その配列はお互いに同じではなかった。【結論】収束的U6とH1プロモーターでのRNAi発現ベクターに基づくランダムRNAiライブラリを構成するための単純で迅速な方法を構築し,機能遺伝子のゲノムスクリーニングに対して基盤を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST

シソーラス用語： *プロモーター領域 ,  *ライブラリ【計算機】 ,  *ベクター ,  *予備調査 ,  *RNA【核酸】 ,  *RNA干渉 ,  *収束 ,  p53遺伝子 ,  プラスミド ,  クローン ,  化学合成 ,  形質転換 ,  DNA【核酸】 ,  比率 ,  ゲノム ,  遺伝子 ,  コヒーレンス ,  細胞 ,  消化 ,  鋳型【遺伝】
準シソーラス用語： *プロモーター ,  *RNAi ,  PCR ,  干渉性

分類 (1件)： 遺伝子の構造と化学  (EC02020U)

タイトルに関連する用語 (7件)： 収束 ,  プロモーター ,  RNAi ,  発現ベクター ,  ライブラリ ,  構築 ,  予備調査