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J-GLOBAL ID：200902288516608620   整理番号：09A0742749

大腸菌における成熟組換え体コレラ毒素Bサブユニットとホロ毒素のリンコマイシン誘導過剰発現

Lincomycin-induced over-expression of mature recombinant cholera toxin B subunit and the holotoxin in Escherichia coli

著者 (8件)： ARIMITSU Hideyuki (Dep. of Microbiology, Fujita Health Univ., School of Medicine, Toyoake, Aichi 470-1192, JPN) ,  TSUKAMOTO Kentaro (Dep. of Microbiology, Fujita Health Univ., School of Medicine, Toyoake, Aichi 470-1192, JPN) ,  OCHI Sadayuki (Dep. of Microbiology, Fujita Health Univ., School of Medicine, Toyoake, Aichi 470-1192, JPN) ,  SASAKI Keiko (Dep. of Microbiology, Fujita Health Univ., School of Medicine, Toyoake, Aichi 470-1192, JPN) ,  KATO Michio (Dep. of Microbiology, Fujita Health Univ., School of Medicine, Toyoake, Aichi 470-1192, JPN) ,  TANIGUCHI Koki (Dep. of Virology and Parasitology, Fujita Health Univ., School of Medicine, Toyoake, Aichi 470-1192, JPN) ,  OGUMA Keiji (Dep. of Bacteriology, Okayama Univ. Graduate School of Medicine and Dentistry, Okayama 700-8558, JPN) ,  TSUJI Takao (Dep. of Microbiology, Fujita Health Univ., School of Medicine, Toyoake, Aichi 470-1192, JPN)
資料名： Protein Expression and Purification  (Protein Expression and Purification)
巻： 67  号： 2  ページ： 96-103  発行年： 2009年10月 
JST資料番号： W0282A  ISSN： 1046-5928  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： コレラ毒素(CT)Bサブユニット(CTB)は大腸菌において,新規な発現系を使用して過剰発現された。発現プラスミドは,完全長のCTBをコードしている遺伝子とCTB,又は毒素原性大腸菌の熱不安定性のエンテロトキシンBサブユニット由来のShine-Dalgarno(SD)配列をpBluescript SK(+)ベクターにおいてlacZα遺伝子断片に挿入することによって構成した。大腸菌MV1184株にそれぞれのプラスミドをトランスフォームし,リンコマイシンを含むCAYE液体培地で培養した。組換え体CTB(rCTB)は,各細胞抽出物から精製された。rCTBは,両形質転換体で明白な毒性なしに過剰発現され,Vibrio choleraeから精製されたCTのそれと構造的,生物学的に同一であった。このことは元々のSDとCTBシグナル配列も又,大腸菌におけるrCTB発現に十分であることを示している。リンコマイシン誘導rCTB発現は,lacプロモーターを変異させることにより阻害され,リンコマイシンがラクトースオペロンに影響していることを示唆している。これらの知見をもとに,野生型のCTオペロンを含むプラスミドを構築し,rCTBに対するものと同じ手法を使用して,CT(rCT)を成功裏に過剰発現した。rCTはインタクトなAサブユニットを持っているが,rCTのAとBサブユニットのアミノ末端修飾と生物学的特性はCTのそれらと同一であった。これらの結果は,この新規なrCTB過剰発現系は,粘膜アジュバント活性のようなCTの特性のさらなる研究を促進する,野生型と変異体CT蛋白質の両者を生成するためにも有用であることを示唆した。Copyright 2009 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *コレラ毒素 ,  組換タンパク質 ,  サブユニット ,  *大腸菌 ,  コレラ菌 ,  *遺伝子発現 ,  レポーター遺伝子 ,  オペロン ,  ヌクレオチド配列 ,  プラスミド ,  プロモーター領域 ,  アミノ糖 ,  窒素複素環化合物 ,  カルボアミド ,  チオ糖 ,  デオキシ糖 ,  ピラノシド ,  Lacオペロン ,  Shine-Dalgarno配列 ,  腸管病原性大腸菌 ,  lacZ ,  腸管毒素原性大腸菌 ,  *微生物 ,  *分子遺伝現象
準シソーラス用語： 病原性大腸菌 ,  LacZ ,  *コレラ毒素B ,  毒素原性大腸菌

分類 (2件)： 微生物の生化学  (EG03020N) ,  遺伝子操作  (EC02050B)

物質索引 (1件)： リンコマイシン

タイトルに関連する用語 (8件)： 大腸菌 ,  成熟 ,  組換え体 ,  コレラ毒素Bサブユニット ,  毒素 ,  リンコマイシン ,  誘導 ,  過剰発現