RNAiライブラリーの酵素的構築方法

発明者： , , , ,
出願人/特許権者：
代理人 (2件)：清水初志 , 新見浩一
公報種別：再公表公報
出願番号（国際出願番号）：JP2004019612
公開番号（公開出願番号）：WO2005-063980
出願日： 2004年12月28日
公開日（公表日）： 2005年07月14日
要約：

本発明により、標的DNAから酵素的に系統的なRNAiライブラリーを調製する方法を提供する。本方法では、標的DNAは特定の遺伝子のcDNAやゲノム配列からだけではなく、cDNAライブラリーからも調製し得る。また、本発明はRNAiライブラリーから所望のサイレンシング活性を有するiRNA発現構築物を備えたクローンを選択し得るスクリーニング方法をも提供する。スクリーニングにおいては、レポータ遺伝子やネガティブ選択マーカーと標的DNAとを融合させることにより効率的な選択を可能にしている。

請求項（抜粋）：

以下の(1)〜(3)の工程を含む、所望の標的DNAからRNAiライブラリーを製造する方法。 (1)標的DNAをランダムに切断し、DNA断片を生成する工程、 (2)ヘアピン型アダプターを、前記DNA断片の一端に接続して、ヘアピン型のDNA断片を生成する工程、 (3)ヘアピン型のDNA断片をStrand-displacing活性を有するポリメラーゼを用いてプライマーエクステンションを実行させ、インターフェアレンスRNAをコードしたiRNA発現構築物を生成させる工程を含む、RNAiライブラリー製造方法。

IPC (3件)：

C12N 15/09 , C12Q 1/02 , C12Q 1/68

FI (3件)：

C12N15/00 A , C12Q1/02 , C12Q1/68 A

Fターム (47件)：

4B024AA11 , 4B024AA20 , 4B024BA80 , 4B024CA04 , 4B024CA05 , 4B024CA06 , 4B024CA07 , 4B024CA09 , 4B024CA11 , 4B024CA12 , 4B024DA02 , 4B024EA02 , 4B024EA04 , 4B024FA02 , 4B024FA10 , 4B024GA11 , 4B024GA18 , 4B024HA08 , 4B024HA09 , 4B024HA12 , 4B024HA14 , 4B063QA01 , 4B063QA18 , 4B063QQ52 , 4B063QQ53 , 4B063QQ79 , 4B063QQ89 , 4B063QR08 , 4B063QR33 , 4B063QR35 , 4B063QR36 , 4B063QR42 , 4B063QR55 , 4B063QR59 , 4B063QR66 , 4B063QR69 , 4B063QR77 , 4B063QR82 , 4B063QS05 , 4B063QS12 , 4B063QS16 , 4B063QS24 , 4B063QS25 , 4B063QS28 , 4B063QS34 , 4B063QS36 , 4B063QX02

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