特許
J-GLOBAL ID:200903007114308609
ランダムフラグメント化および再組立によるDNA変異誘発
発明者:
,
出願人/特許権者:
代理人 (1件):
山本 秀策
公報種別:公表公報
出願番号(国際出願番号):特願平7-521977
公開番号(公開出願番号):特表平10-500561
出願日: 1995年02月17日
公開日(公表日): 1998年01月20日
要約:
【要約】ランダムフラグメント化後のDNA再組立のための方法、およびインビトロまたはインビボにおける組換えによる核酸配列の変異誘発のためのその適用を開示する。詳細には、変異タンパク質をコードする核酸フラグメントまたはポリヌクレオチドの生成のための方法を開示する。本発明はまた、タンパク質のインビトロまたはインビボにおける直接的な分子進化を可能にする変異誘発、再編成および選択の反復サイクルの方法に関する。
請求項(抜粋):
1つ以上の変異を鋳型2本鎖ポリヌクレオチドへ導入するための方法であって、ここで該鋳型2本鎖ポリヌクレオチドは、所望の大きさの2本鎖のランダムフラグメントに切断され、以下の工程: a)得られる2本鎖フラグメントの集団に1つ以上の1本鎖オリゴヌクレオチドまたは2本鎖オリゴヌクレオチドを添加する工程であって、ここで該オリゴヌクレオチドが、鋳型ポリヌクレオチドに対して同一な範囲および非相同な範囲を含む、工程; b)得られる2本鎖のランダムフラグメントおよびオリゴヌクレオチドの混合物を1本鎖フラグメントに変性する工程; c)得られる1本鎖フラグメントの集団を、該1本鎖フラグメント間の同一の領域で該1本鎖フラグメントがアニールし、そして変異誘発された2本鎖ポリヌクレオチドを形成する条件下で、ポリメラーゼとともにインキュベートする工程;および d)(b)および(c)の工程を反復する工程;を包含する、方法。
IPC (2件):
C12N 15/09 ZNA
, C12P 21/08
FI (2件):
C12N 15/00 ZNA A
, C12P 21/08
引用特許:
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