mRNA増幅

発明者： ,
出願人/特許権者：
代理人 (3件)：大野聖二 , 森田耕司 , 田中玲子
公報種別：公表公報
出願番号（国際出願番号）：特願2001-569407
公開番号（公開出願番号）：特表2004-508010
出願日： 2001年03月23日
公開日（公表日）： 2004年03月18日
要約：

本発明は,試料のmRNAを増幅する方法に関し,該方法は,i.)ポリアデニル化RNAにハイブリダイズし,かつ5’ポリ(C)または5’ポリ(G)フランクを含む少なくとも1つのプライマーを用いてポリアデニル化RNAからcDNAを生成し;ii.)(aa)ハイブリダイズしていない余剰のプライマーおよび/または余剰のdNTPが存在する場合にはこれを除去し;ii.)(ab)前記生成したcDNAを,工程iにおいて5’ポリ(C)フランクを含むプライマーを用いた場合にはポリ(G)テイルを用いて,または工程iにおいて5’ポリ(G)フランクを含むプライマーを用いた場合にはポリ(C)テイルを用いて3’テイリングを行い;またはii.)(b)余剰のプライマーおよび/または余剰のdNTPの存在または非存在にかかわらず,前記生成したcDNAを,工程iにおいて5’ポリ(C)フランクを含むプライマーを用いた場合にはポリ(G)テイルを用いて,または工程iにおいて5’ポリ(G)フランクを含むプライマーを用いた場合にはポリ(C)テイルを用いて,RNA-リガーゼを用いて3’テイリングを行い;iii.)テイリングしたcDNAを,工程ii(ab)またはii(b)において生成したテイルにハイブリダイズしたプライマーを用いて増幅する,の各工程を含む。本発明はさらに,mRNAの増幅の前記方法を用いて,試験試料において発現されている遺伝子を同定するために,病理学的状態の治療のための薬剤候補物を同定するために,および病理学的状態をインビトロで検出するために,インビトロ代用物を製造する方法に関する。本発明はさらに,本発明の方法により得られた増幅されたcDNAを,ハイブリダイゼーション,相互作用および/または酵素アレイにおいて用いることに関する。

請求項（抜粋）：

試料のmRNAを増幅する方法であって, i.ポリアデニル化RNAにハイブリダイズし,5’ポリ(C)または5’ポリ(G)フランクを含む少なくとも1つのプライマーを用いてポリアデニル化RNAからcDNAを生成し; ii.(aa)ハイブリダイズしていない余剰のプライマーおよび/または余剰のdNTPが存在する場合にはこれを除去し; (ab)前記生成したcDNAを,工程iにおいて5’ポリ(C)フランクを含むプライマーを用いた場合にはポリ(G)テイルを用いて,または工程iにおいて5’ポリ(G)フランクを含むプライマーを用いた場合にはポリ(C)テイルを用いて,3’テイリングを行い;または (b)余剰のプライマーおよび/または余剰のdNTPの存在または非存在にかかわらず,前記生成したcDNAを,工程iにおいて5’ポリ(C)フランクを含むプライマーを用いた場合にはポリ(G)テイルを用いて,または工程iにおいて5’ポリ(G)フランクを含むプライマーを用いた場合にはポリ(C)テイルを用いて,RNA-リガーゼを用いて3’テイリングを行い;そして iii.テイリングしたcDNAを,工程ii(ab)またはii(b)において生成したテイルにハイブリダイズするプライマーを用いて増幅するの各工程を含む方法。

IPC (8件)：

C12N15/09 , C12N5/10 , C12Q1/68 , G01N33/15 , G01N33/50 , G01N33/53 , G01N33/566 , G01N37/00

FI (8件)：

C12N15/00 A , C12Q1/68 A , G01N33/15 Z , G01N33/50 Z , G01N33/53 M , G01N33/566 , G01N37/00 102 , C12N5/00 B

Fターム (57件)：

2G045AA40 , 2G045BA14 , 2G045BB03 , 2G045BB20 , 2G045BB24 , 2G045CA25 , 2G045CB01 , 2G045CB03 , 2G045CB04 , 2G045DA12 , 2G045DA13 , 2G045DA14 , 2G045DA30 , 2G045DA36 , 2G045DA37 , 2G045FA16 , 2G045FB02 , 2G045FB03 , 4B024AA01 , 4B024AA11 , 4B024BA80 , 4B024CA04 , 4B024CA09 , 4B024CA12 , 4B024HA08 , 4B024HA12 , 4B063QA01 , 4B063QA18 , 4B063QA19 , 4B063QQ02 , 4B063QQ08 , 4B063QQ53 , 4B063QR08 , 4B063QR14 , 4B063QR20 , 4B063QR36 , 4B063QR42 , 4B063QR50 , 4B063QR55 , 4B063QR56 , 4B063QR62 , 4B063QR66 , 4B063QR72 , 4B063QR77 , 4B063QS03 , 4B063QS24 , 4B063QS25 , 4B063QS28 , 4B063QS34 , 4B063QS36 , 4B063QX02 , 4B065AA90X , 4B065AA90Y , 4B065AA93Y , 4B065AB01 , 4B065CA44 , 4B065CA46

前のページに戻る