特許

J-GLOBAL ID：200903051302596084

核酸断片の効率的連結

発明者： リュー,チャン
出願人/特許権者： シティ・オブ・ホープ
代理人 (1件)： 社本 一夫 (外5名)
公報種別：公表公報
出願番号（国際出願番号）：特願2000-513972
公開番号（公開出願番号）：特表2001-518310
出願日： 1998年09月25日
公開日（公表日）： 2001年10月16日
要約：

【要約】遺伝子断片連結は簡便で費用効率的な方法を提供し、単一遺伝子あるいは複数遺伝子の連結された断片を含む増幅されたDNA配列を産生する。本発明は、マルチプレックスPCRでの遺伝子配列の増幅、および単一反応におけるエクソンの連結を含む。遺伝子断片のマルチプレックスPCRは、一回のポリメラーゼ連鎖反応において遺伝子断片の連結および連結した遺伝子の増幅を可能とする相補的な尾部を持つプライマーを用いて行われる。二つのPCRステップにおいていくつかのイントロンを含むゲノムDNAから増幅されたDNAを構成する能力は、以前には多くの時間の浪費と費用のかかるステップが要求されていたDNA産生を迅速にする。

請求項（抜粋）：

a. 連結される最初のDNA断片のアンチセンス鎖に対して相補的な第1プライマー、および連結される最後のDNA断片のセンス鎖に対して相補的な第2プライマー;および b. 3'から5'のエクソヌクレアーゼ活性を失っている少なくとも一つのポリメラーゼ、および3'から5'のエクソヌクレアーゼ活性を含む少なくとも一つのポリメラーゼの使用を含む、連結される各DNA断片が1つまたは複数のDNA断片中の配列と相補的な配列を含んでいる、標的DNAの隣接しない部分において起きる、PCRによるDNA断片の連結方法。

IPC (2件)：

C12N 15/09 ZNA ,  C12Q 1/68

FI (2件)：

C12Q 1/68 A ,  C12N 15/00 ZNA A

Fターム (13件)：

4B024AA20 ,  4B024CA01 ,  4B024CA11 ,  4B024HA14 ,  4B024HA19 ,  4B024HA20 ,  4B063QQ42 ,  4B063QR08 ,  4B063QR32 ,  4B063QR42 ,  4B063QS25 ,  4B063QS34 ,  4B063QX02